DPBS ve PBS karşılaştırması
PBS veya fosfat tamponlu tuzlu su ve Dulbecco'nun fosfat tamponlu tuzlu su (DPBS), biyolojik çalışmalarda kullanılan tamponlu tuzlu sulardır. PBS ve DPBS hücreleri içeren araştırmalarda kullanılır. Çözeltinin iyon konsantrasyonu ve ozmolaritesi izotoniktir, yani insan vücudu ile uyumludur. Tampon, 7.2-7.6'lık kararlı bir pH sağlamayı ve korumayı kolaylaştırır.
PBS ve DPBS arasında anlamlı bir fark yoktur. Her ikisi de sodyum fosfat, sodyum klorür ve gerektiğinde potasyum fosfat ve potasyum klorür içerir. DPBS gibi diğer preparatlar, kalsiyum ve magnezyum içerebilir veya içermeyebilir. PBS ve DPBS çok sayıda uygulamaya sahiptir, çünkü hücreler için zararlı değildirler. Hem PBS hem de DPBS, hücrelerle kontamine olmuş aletleri veya kapları durulamak için kullanılabilir. Ayrıca, her ikisi de seyreltici maddelerde kullanılabilir. Protein gibi seyrelticiler içindeki su molekülleri durdurulur ve kurutulur. Madde ile birleşen su, maddeyi denatürasyon gibi konformasyonel değişikliklere maruz bırakmaz. Kalsiyum ve magnezyum çözeltileri tripsin aktivitesini kısıtlayabilir. Elippsometride, proteinin adsorpsiyonu, PBS kullanımı ile bir temel spektrum alınarak ölçülebilir.
EDTA gibi katkı maddeleri içeren fosfat tamponlu salin, demet haline getirilmiş hücreleri ayırmak için kullanılabilir. Yağış, PBS'ye iki değerlikli bir metal olan çinko eklendiğinde oluşur, bu yüzden hücreleri ayırmak için eklenemez. Bu tür durumlarda çinko yerine mal tamponu kullanılır.
Fosfat tamponlu tuzlu su ve Dulbecco'nun fosfat tamponlu tuzlu su çeşitli şekillerde hazırlanır. Hazırlamanın bir yolu 800 g çözmektir. sodyum klorür, 20 g. potasyum klorür, 2 molekül su, 24 g. potasyum fosfat ve 144 g. 8 L. damıtılmış suda sodyum fosfat. Sonuç 10 litre 10x PBS olacaktır. Tamponlu çözeltiler hazırlarken bir pH metre kullanarak doğrudan PBS'nin pH'ını ölçün. Çözeltinin pH'ı, sodyum hidroksit veya hidroklorik asit kullanılarak ayarlanabilir. Seyreltici olarak fosfat tamponlu salin, nihai konsantrasyonu 10 mM Fosfat, 137 mM Sodyum klorür, 2.7 mM potasyum klorür ve 7.4 pH ile hazırlanır. Fritsch, Sambrook ve Maniatis'in “Molecular Cloning” başlıklı kitabında tampon çözeltiler hazırlama konusunda kendi yolları var. Buna göre, 1x PBS litre için 800 ml ile hazırlanmaya başlayın. damıtılmış su. 8 g ekleyin. sodyum klorürün yanı sıra 0.2 g. potasyum klorür. 1.44 g. daha sonra sodyum fosfat ilave edildikten sonra 0.24 g ilave edilir. potasyum fosfat. PH'ı 7.4'e ayarlamak için hidroklorik asit koyun. 1 litre PBS elde etmek için, 1 litreye kadar düzleştirilene kadar daha fazla damıtılmış su ekleyin. Elde edilen çözeltiyi bir porsiyon haline getirin ve çözeltiyi sterilize etmek için otoklavı kullanın. Otoklavı 121 ° C'ye ayarlayın ve sıvı döngüsünde 20 dakika otoklavlayın. Daha sonra çözeltiyi oda sıcaklığında saklayın.
Her ne kadar fosfat tamponlu tuzlu su ve Dulbecco'nun fosfat tamponlu tuzlu su birçok şekilde hazırlansa da, içerikler hala aynıdır. Bu nedenle, nasıl hazırlanırsa üretilsin, sonuçlar ve kullanımlar hala aynı.
Özet:
1.PBS veya fosfat tamponlu tuzlu su ve Dulbecco fosfat tamponlu tuzlu su (DPBS), biyolojik çalışmalarda kullanılan tamponlu tuzlu sulardır.
2. çözeltinin iyon konsantrasyonu ve ozmolaritesi izotoniktir, yani insan vücudu ile uyumludur. Tampon, 7.2-7.6'lık kararlı bir pH sağlamayı ve korumayı kolaylaştırır.
PBS ve DPBS arasında anlamlı bir fark yoktur. Her ikisi de sodyum fosfat, sodyum klorür ve gerektiğinde potasyum fosfat ve potasyum klorür içerir. DPBS gibi diğer preparatlar kalsiyum ve magnezyum içerebilir veya içermeyebilir.
Hem PBS hem de DPBS, hücrelerle kontamine olmuş aletleri veya kapları durulamak için kullanılabilir. Ayrıca, her ikisi de seyreltici maddelerde kullanılabilir. Protein gibi seyrelticiler içindeki su molekülleri durdurulur ve kurutulur. Madde ile birleşen su, maddeyi denatürasyon gibi konformasyonel değişikliklere maruz bırakmaz. Kalsiyum ve magnezyum çözeltileri tripsin aktivitesini kısıtlayabilir. Elippsometride, proteinin adsorpsiyonu, PBS kullanımı ile bir temel spektrum alınarak ölçülebilir.
5. EDTA gibi katkı maddeleri içeren fosfat tamponlu salin, paketlenmiş hücreleri ayırmak için kullanılabilir. Yağış, PBS'ye iki değerlikli bir metal olan çinko eklendiğinde oluşur, bu yüzden hücreleri ayırmak için eklenemez. Bu tür durumlarda çinko yerine mal tamponu kullanılır.
6.PBS ve DPBS çeşitli şekillerde hazırlanmaktadır. Her ne kadar fosfat tamponlu tuzlu su ve Dulbecco'nun fosfat tamponlu tuzlu su birçok şekilde hazırlansa da, içerikler hala aynıdır. Bu nedenle, nasıl hazırlanırsa üretilsin, sonuçlar ve kullanımlar hala aynı.