Afinite ve İyon Değişimi Kromatografisi Arasındaki Fark

temel fark afinite ve iyon değişim kromatografisi arasında yüklü veya yüklü olmayan bileşenleri bir karışımda ayırmak için afinite kromatografisini kullanabiliriz, bir karışımdaki yüklü bileşenleri ayırmak için iyon değişim kromatografisini kullanabiliriz.

Kromatografi, istenen bileşenleri bir karışımda ayırmak için kullanabileceğimiz bir tekniktir. Sıvı kromatografisi, gaz kromatografisi, vs. gibi farklı tipler vardır. Afinite kromatografisi ve iyon değiştirme kromatografisi, sıvı kromatografisinin iki alt kategorisidir. Ayrıca, bu tekniklerde iki aşama vardır. Yani, sabit faz ve mobil fazdırlar. Bu tekniklerin amacı, hareketli fazdaki bileşenlerin bağlanmasına bağlı olarak bileşenleri sabit fazın yüzeyine ayırmaktır.

İÇİNDEKİLER

1. Genel Bakış ve Temel Fark
2. Afinite Kromatografisi Nedir
3. İyon Değişimi Kromatografisi Nedir
4. Yan Yana Karşılaştırma - Tablo Şeklinde Afinite ve İyon Değişimi Kromatografisi
5. Özet

Afinite Kromatografisi Nedir?

Afinite kromatografisi, bu bileşenler arasındaki etkileşimlere bağlı olarak bir karışımdaki bileşenleri ayırmak için kullandığımız biyokimyasal bir tekniktir.

Bu durumda kullandığımız etkileşimler şunları içerir:

1. Antijen-antikor etkileşimleri
2. Enzim-substrat etkileşimleri
3. Reseptör-ligand etkileşimleri
4. Protein-nükleik asit etkileşimleri

Bu teknikte, bu ayırma tekniği için moleküllerin moleküler özelliklerini kullanıyoruz. Burada, istenen bileşiğin hidrojen bağı, iyonik etkileşim, disülfid köprüleri, hidrofobik etkileşim, vb. Vasıtasıyla sabit bir fazla etkileşmesine izin veririz. Böylece, karışımdan ayırabiliriz. İstenen bileşik sabit faza bağlı kalacaktır. Bu nedenle, bir elüt çözücü kullanarak ayırabilir ve ayırmak için elüt yapabiliriz.

Resim 01: Kromatografik Bir Sütun

Afinite kromatografisi, bir maddenin bir tampon çözeltisi kullanılarak bir karışımdan saflaştırılmasında ve konsantre edilmesinde faydalıdır. Ayrıca, bir karışımdaki istenmeyen maddelerin azaltılmasında yardımcı olur. Bu işlem için kullandığımız cihazı düşünürken, sabit fazımızla dolu bir sütun kullanmalıyız. Ardından, ayıracağımız biyomolekülleri içeren mobil fazı yüklemeliyiz. Ardından, sabit faz ile bağlanmasına izin verin. Daha sonra, bir yıkama tamponu kullanarak, hedef olmayan biyomolekülleri ayırabiliriz, ancak hedef moleküllerin, ayırma işlemini başarmak için sabit faz için yüksek bir afinitesi olmalıdır..

İyon Değişimi Kromatografisi Nedir?

İyon kromatografisi, iyonik maddeleri analiz edebileceğimiz bir sıvı kromatografisidir. Genellikle, inorganik anyonları ve katyonları (yani klorür ve nitrat anyonları ve potasyum, sodyum katyonları) analiz etmek için kullanırız. Daha az yaygın olmasına rağmen, organik iyonları da analiz edebiliriz. Dahası, bu tekniği proteinlerin saflaştırılması için kullanabiliriz, çünkü proteinler belirli pH değerlerinde yüklü moleküllerdir. Burada, yüklü parçacıkların bağlanabileceği katı bir sabit faz kullanıyoruz. Örneğin, reçine polistiren-divinilbenzen kopolimerlerini katı destek olarak kullanabiliriz.

Resim 02: İyon Değişimi Kromatografisinin Aşamaları

Bunu daha fazla açıklamak için, durağan faz, sülfat anyonları veya kuaterner amin katyonları gibi sabit iyonlara sahiptir. Bu sistemin nötrlüğünü koruyacaksak, bunların her biri bir karşı iyonla (zıt yüklü bir iyon) ilişkilendirilmelidir. Burada karşıt iyon bir katyon ise, sistemi katyon değişim reçinesi olarak adlandırırız. Ancak, karşı iyon bir anyon ise, sistem bir anyon değişim reçinesidir.

İyon değiştirme işleminde beş ana aşama vardır;

1. İlk aşama
2. Hedefin adsorpsiyonu
3. Elüsyonun başlaması
4. Elüsyonun sonu
5. yenilenme

Afinite ve İyon Değişimi Kromatografisi Arasındaki Fark Nedir??

Afinite kromatografisi, bu bileşenler arasındaki etkileşimlere bağlı olarak bir karışımdaki bileşenleri ayırmak için kullandığımız bir biyokimyasal tekniktir, oysa iyon kromatografisi, iyonik maddeleri analiz edebileceğimiz bir sıvı kromatografi formudur. Bu nedenle, afinite ve iyon değişim kromatografisi arasındaki en büyük fark, iyon değişim kromatografisini sadece iyonik maddelerin ayrılması için kullanabilmemizdir, afinite kromatografisi ise hem yüklü hem de yüklü olmayan partikülleri ayırabilir. Çalışma prensibi göz önüne alındığında, afinite ve iyon değişim kromatografisi arasındaki fark, afinite kromatografisinin, hedef moleküllerin sabit faz için yüksek bir afiniteye sahip olmasından dolayı ilerlemesidir. Bununla birlikte, iyon değişim kromatografisi için, hedef moleküllerin, sabit faz yüzeyininkine zıt bir yükü vardır..

Aşağıdaki infografik, yan yana karşılaştırma olarak afinite ve iyon değişim kromatografisi arasındaki farkı sunar.

Özet - Afinite ve İyon Değişimi Kromatografisi

Özet olarak, afinite ve iyon değişim kromatografisi, sıvı kromatografik tekniklerin iki formudur. Afinite ve iyon değişim kromatografisi arasındaki temel fark, bir karışımdaki yüklü veya yüklü olmayan bileşenleri ayırmak için afinite kromatografisini kullanabilmemizdir, oysa bir karışımdaki yüklü bileşenleri ayırmak için iyon değiştirme kromatografisini kullanabiliriz.

Referans:

1. “Afinite Kromatografisi.” Vikipedi, Wikimedia Vakfı, 5 Ekim 2018. Buradan erişebilirsiniz 
2. Libreteksler. “İyon Değiştirici Kromatografi.” Kimya LibreTexts, Libretexts, 29 Aralık 2016. Buradan ulaşabilirsiniz  

Görünüm inceliği:

1. ”Nikel reçinesi” Pdcook tarafından - Commons Wikimedia üzerinden kendi çalışması, (CC BY-SA 3.0) 
2. Commons Wikimedia üzerinden Daliak (Public Domain) tarafından “Iex”