Doğrudan ve Dolaylı İmmünofloresan Arasındaki Fark

temel fark doğrudan ve dolaylı immünofloresan arasında doğrudan immünofloresan, ilgilenilen hedefe karşı çalışan tek bir antikor kullanırken dolaylı immünofloresan, ilgilenilen hedefi etiketlemek için iki antikor kullanır.

İmmünofloresan veya hücre görüntüleme, belirli bir hedef antijeni bir florofor ile etiketlemek için kullanılan bir tekniktir. Burada, florofor, ışık uyarımı üzerine tekrar ışık yayabilecek bir floresan kimyasal bileşiktir. Bir florofor hedef antijene bağlandığında, numunedeki hedef molekülün saptanmasına izin verir. Bunu daha da açıklamak için, bir antijen spesifik bir antikorla bağlandığında floroforlarla konjuge edilebilir. Bu nedenle, floresan mikroskop altında gözlem yaparken numunedeki hedef antijenin varlığını tespit etmek kolaydır.

Ayrıca, iki tip immünofloresan vardır; doğrudan ve dolaylı immünofloresan. Doğrudan ve dolaylı immünofloresan arasındaki fark esas olarak kullanılan antikorların sayısında ve florofor konjugasyonunda yatmaktadır. Yani, doğrudan immünofloresanda, florofor doğrudan birincil antikora konjüge ederken, dolaylı immünofloresan, florofor ikincil antikorla konjüge olur.

İÇİNDEKİLER

1. Genel Bakış ve Temel Fark
2. Doğrudan İmmünofloresan Nedir
3. Dolaylı İmmünofloresan Nedir
4. Doğrudan ve Dolaylı İmmünofloresan Arasındaki Benzerlikler
5. Yan Yana Karşılaştırma - Doğrudan ve Dolaylı İmmünofloresan Tablo Şeklinde
6. Özet

Doğrudan İmmünofloresan Nedir?

İmmünofloresan spesifik hedef antijenleri saptamak için antikorlar kullanır. Doğrudan immünofloresan, iki immünofloresan tipinden biridir. Doğrudan immünofloresansta, tek bir antikor (birincil antikor) içerir ve florofor doğrudan birincil antikorla konjüge olur. Antikorun hedef antijen ile bağlanması üzerine, florofor bir floresan mikroskobu ile tespit edilebilen floresan yayar..

Şekil 01: Doğrudan İmmünofloresan

Bununla birlikte, direkt immünofloresan pahalı bir yöntemdir çünkü primer konjüge edilmiş antikorlar sekonder antikorlara kıyasla maliyetlidir. Bununla birlikte, ek bir adım, dolayısıyla daha kısa bir teknik içermez. Ayrıca spesifik olmayan bağlamalar, doğrudan immünofloresansta azalır. Bu nedenle, türlerin çapraz reaktivitesi düşüktür. Ancak saptamada, doğrudan immünofloresan duyarlılığı dolaylı immünofloresan ile karşılaştırıldığında zayıftır .

Dolaylı İmmünofloresan Nedir?

Dolaylı immünofloresan, hedef antijenin etiketlenmesinde birincil ve ikincil antikorlar gibi iki tip antikor içeren ikinci immünofloresan tipidir. Bu yöntemde, florofor ikincil antikorla konjüge olur. Bu nedenle, bu teknik ek bir adım içerir.

Resim 02: İmmünofloresan

Bununla birlikte, bu yöntemde duyarlılık yüksektir, çünkü birkaç florofor ikincil antikorlara konjüge edilebilir ve tespiti kolaylaştırır. Ayrıca, ikincil antikorların konjugasyonunun daha az pahalı ve daha kolay olması nedeniyle dolaylı immünofloresan daha az pahalıdır. Direkt immünofloresan ile karşılaştırıldığında, türler dolaylı yöntemde çapraz reaktivite yüksektir.

Doğrudan ve Dolaylı İmmünofloresan Arasındaki Benzerlikler Nelerdir??

• İki tip immünofloresan tekniğidir.
• Birincil antikorlar ve florofor her iki yöntemi de içerir.
• Ayrıca, antijen-antikor reaksiyonu her iki yöntemde de meydana gelir.
• Ayrıca, hem doğrudan hem de dolaylı immünofloresan, antijenin tespiti için bir floresan mikroskobu kullanır..

Doğrudan ve Dolaylı İmmünofloresan Arasındaki Fark Nedir??

İmmünofloresan kullanılan antikorlarla florofor konjugasyonuna bağlı olarak doğrudan veya dolaylı olabilir. Doğrudan immünofloresansta, florofor, bu tekniğe dahil olan tek antikor olan birincil antikor ile konjuge olur. Bunun aksine, dolaylı immünofloresanda florofor, teknikte yer alan iki tip antikordan biri olan ikincil antikorla konjuge olur. Bu nedenle, doğrudan ve dolaylı immünofloresan arasındaki ana fark, florofor ile konjuge olan antikor türüdür..

Aşağıdaki infografik, doğrudan ve dolaylı immünofloresan arasındaki farkın yan yana karşılaştırılmasını sağlar..

Özet - Doğrudan vs Dolaylı İmmünofloresan

İmmünofloresan, bir örnekteki spesifik antijenlerin varlığını tespit etmek için kullanılan bir tekniktir. Bu teknik spesifik antikorlar kullanır. Bu nedenle, bu durumda, antikorlar bir floresan mikroskop kullanarak tespit etmek için floroforlarla konjuge olur. Ayrıca, doğrudan ve dolaylı immünofloresan olmak üzere iki tip immünofloresan vardır. Doğrudan immünofloresan, tek bir antikor ve doğrudan bu antikora konjüge edilmiş florofor içerir. Dolaylı immünofloresan iki antikor içerir; birincil ve ikincil ve ikincil antikora konjüge edilmiş florofor. Birkaç ikincil antikor bir birincil antikor ile bağlanabildiğinden ve birkaç florofor ikincil antikorlarla konjüge edilebildiğinden, dolaylı immünofloresan doğrudan yönteme göre daha hassas bir yöntemdir. Ayrıca, dolaylı yöntem doğrudan yöntemden daha ucuzdur. Dolayısıyla, bu doğrudan ve dolaylı immünofloresan arasındaki farktır.

Referans:

1. “İmmünoflöresan.” Vikipedi, Wikimedia Foundation, 19 Ağustos 2018. Buradan ulaşabilirsiniz 

Görünüm inceliği:

1. ”HSP IF IgA” Emmanuelm tarafından en.wikipedia'da (CC BY 3.0) Commons Wikimedia üzerinden
2. ”Immünofloresan” Westhayl618 tarafından - Commons Wikimedia üzerinden kendi çalışması, (CC BY-SA 4.0)