temel fark gen amplifikasyonu ile gen klonlaması arasında gen amplifikasyonu ilgili genin birçok kopyasını alma işlemidir laboratuvar ortamında bir polimeraz zincir reaksiyonu ile. Ancak, gen klonlaması, ilgilenilen genin birçok kopyasını yapma işlemidir in vivo bir rekombinant plazmid yapmak ve bunu bir konakçı bakteriye dönüştürmek.
Bir gen, bir proteini kodlayan spesifik bir DNA parçasıdır. Bir organizma binlerce gene sahiptir. Ayrıca, önemli genlerin DNA dizilerini moleküler biyolojik teknikler kullanarak çoğaltmak mümkündür. Gen amplifikasyonu ve gen klonlaması bu tür iki prosedürdür. Her iki prosedür de ilgilenilen bir genin birçok kopyasını üretir. Bununla birlikte, gen amplifikasyonu ile gen klonlaması arasında metodolojileri açısından bir fark vardır..
1. Genel Bakış ve Temel Fark
2. Gen Büyütmesi Nedir
3. Gen Klonlaması nedir
4. Gen Büyütmesi ve Gen Klonlaması Arasındaki Benzerlikler
5. Yan Yana Karşılaştırma - Tablo Amplifikatöründe Gen Amplifikasyonuna Karşı Gen Klonlaması
6. Özet
Gen amplifikasyonu, polimeraz zincir reaksiyonu kullanılarak belirli bir genin kopyalarını oluşturma işlemidir. Bir geni yükseltmek için, söz konusu organizmanın DNA'sı uygun bir DNA ekstraksiyon protokolü kullanılarak ekstrakte edilmelidir. Daha sonra ekstrakte edilen çift sarmallı DNA, ayrı tek sarmallar elde etmek için denatüre edilmelidir. Bir sonraki adım ilgili genin kopyalarını yapmak için bir PCR reaksiyonunun kullanılmasını içerir. Ayrıca, PCR karışımı gerekli primerleri, nükleotidleri, DNA polimeraz enzimini, şablon DNA'yı ve diğer bileşenleri içerir. PRC programının sonunda, ilgili genin amplifikasyonu gerçekleşir.
Şekil 01: Gen Amplifikasyonu
Ayrıca gen amplifikasyonu, spesifik bir sekansın saptanmasında, bir organizmanın tanımlanmasında, hastalıkların teşhis edilmesinde ve gen kütüphanelerinin yapılmasında vb..
Gen klonlaması, genetik mühendisliğinde gen kütüphaneleri yapmak veya ilgilenilen genin birçok kopyasını yapmak için bir yöntemdir. Bu işlem bir rekombinant plazmid yapılmasını ve rekombinant plazmidin bir konakçı hücreye, özellikle bir bakteri hücresine dönüştürülmesini içerir. Klon, orijinal organizmanın veya bir molekülün aynı kopyasıdır. Gen klonlaması binlerce gen klonu yapabilir.
Resim 02: Gen Klonlama
İlgilenilen gen tanımlandıktan sonra, belirli bir organizmanın genomundan spesifik kısıtlama enzimleri ile sınırlandırılarak ayrılabilir. Daha sonra aynı kısıtlama enzimi kullanılarak, gen fragmanını sokmak için plazmidler (vektörler) açılmalıdır. Daha sonra rekombinant plazmid, elektroporasyon gibi farklı yöntemler kullanılarak bir konakçı bakteriye dönüştürülür. Rekombinant plazmidlerin bazıları konakçı bakteri hücrelerine girer. Bir antibiyotik kullanarak, dönüştürülmüş bakteriler seçilebilir, izole edilebilir ve taze ortamlarda yetiştirilebilir. Böylece, bu teknik milyonlarca gen klonunun elde edilmesine yardımcı olur..
Gen amplifikasyonu, belirli bir genin kopyalarını kullanarak laboratuvar ortamında PCR adı verilen yöntem. Diğer yandan, gen klonlaması, belirli bir genin kopyalarını kullanan bir işlemdir. in vivo yöntemi ile rekombinant vektörlerin oluşturulması ve canlı organizmada çoğaltılması ile elde edilir. Bu, gen amplifikasyonu ile gen klonlaması arasındaki temel farktır. Ayrıca, gen amplifikasyonu sadece birkaç saat sürerken, gen klonlamanın tamamlanması birkaç gün sürer. Bu nedenle bunu gen amplifikasyonu ile gen klonlaması arasındaki bir fark olarak da düşünebiliriz. Dahası, gen amplifikasyon işlemi daha az hata gösterirken, gen klonlama işlemi daha fazla hata gösterir.
Aşağıdaki infografik, gen amplifikasyonu ile gen klonlaması arasındaki farkı özetler.
Gen amplifikasyonu, in vitro koşullar altında polimeraz zincir reaksiyonu kullanılarak arzu edilen genin kopyalarının yapılması işlemidir; gen klonlaması, rekombinant DNA molekülü ve canlı bir organizma / konakçı bakteri kullanılarak ilgilenilen bir genin kopyalarının yapılması işlemidir. Bu nedenle, gen amplifikasyonu ile gen klonlaması arasındaki temel fark budur..
1. “Moleküler Klonlama.” Vikipedi, Wikimedia Foundation, 2 Ağustos 2019, Burada mevcut.
2. “Gen Amplifikasyonu.” Gen Amplifikasyonu - Genel Bakış | ScienceDirect Konular, Buradan erişilebilir.
1. Madprime tarafından “PCR” - Commons Wikimedia üzerinden kendi çalışması (CC BY-SA 3.0)
2. “Moleküler Klonlamanın Adımları” Alexpicardal97 tarafından - Commons Wikimedia üzerinden kendi çalışması (CC BY-SA 4.0)