Mikroskopi bağlamında, boyama, mikroskopik görüntünün kontrastının arttırılması sırasında, özellikle biyolojik dokulardaki farklı yapıları vurgulamak için önemli bir adım olarak kabul edilir. Periferik kan ve kemik iliği lekelerinin boyanması sırasında Wright ve Giemsa lekeleri kullanılır. Bu lekeler Romanowsky lekeleri olarak bilinir. Bu lekelerin her ikisi de önemli bileşenlerden oluşur: oksitlenmiş metilen mavisi, eozin Y ve azure B boyaları. Metilen mavisi ve masmavi B'nin işlevi, çekirdeği maviden mora değişen renklerle boyamaktır. Bu lekeler, kırmızı kan hücresi morfolojisinin incelenmesi sırasında ve diferansiyel beyaz kan hücresi sayımlarının performansı sırasında yaygın olarak kullanılmaktadır. Lösemi gibi farklı hastalık durumlarının teşhisi Romanowsky boyama prosedürleri ile gerçekleştirilebilir.. Wright boyaması, eozin ve metilen mavisi boyaların bir karışımından oluşan kan hücrelerini ayırt etmek için kullanılır. Giemsa boyama, insan hücrelerinin yanı sıra bakteri hücrelerinin boyanması sırasında kullanılır ve Giemsa Wright boyasını geliştirmek için Wright boyası ile birleştirilebilir. Giemsa boyası ile Wright boyası arasındaki temel fark budur..
Giemsa lekesi, sıtmanın ve diğer paraziter hastalıkların parazitlerinin sitogenetik ve histopatolojik tanısı için kullanılır. Giemsa lekesi, Kiel sınıflandırmasında lenfomaların sınıflandırılmasında temel bir leke olarak da düşünülebilir. Giemsa boyası, yaygın olarak G-bantlaması olarak bilinen Giemsa bantlaması için gereklidir. Giemsa bantlama kromozomları lekelemek için kullanılır ve karyogramların oluşturulmasında da kullanılır. Translokasyonlar ve yeniden düzenlemeler gibi kromozomal anormallikler Giemsa bantlaması ile tanımlanır. Giemsa lekesi, nükleer membran ve kromatinin yüksek kalitede boyanması, bazı hücresel bileşenlerin metakromasisi ve hücre tipine dayalı farklı sitoplazmik boyanma özellikleri nedeniyle histolojide kullanılır..
Resim 01: Giemsa Lekesi
Giemsa çözeltisi metilen mavisi, Azure B ve eozin içerir ve leke ticari olarak Giemsa tozu kullanılarak hazırlanır. Lekenin stabilitesi, bir eozinat oluşturan metilen mavisi ile birlikte metilen azure ve karışımına bağlıdır. Giemsa boyası, DNA zincirindeki fosfat grupları için özeldir ve yüksek miktarda adenin-timin bağlarının bulunduğu alanlara bağlanır. Giemsa boyama yönteminde, örneğin ince bir tabaka, başlangıçta mikroskobik bir lam üzerine, birkaç damla saf metanol ile yaklaşık 30 saniye boyunca yerleştirilir. Daha sonra slayt, yaklaşık 20-30 dakika boyunca taze olarak hazırlanan% 5 Giemsa leke çözeltisine daldırılır. Son olarak, slayt musluk suyu ile yıkanır ve kurumaya bırakılır. Giemsa lekesi diferansiyel bir leke olarak bilinir çünkü Wright'ın -Giemsa Lekesi, Wright'ın lekesi Giemsa ile birleştirildiğinde oluşur. Bu nedenle, insan hücrelerine bağlı patojenik bakterilerin incelenmesinde kullanılabilir. Burada insan hücreleri ve bakteri hücreleri farklı şekilde boyanır ve sırasıyla mor ve pembe renkler gözlenir..
Wright'ın lekesi, Romanowsky lekesini değiştiren James Homer Wright'ın adını almıştır. Wright'ın lekesi, kan hücresi tiplerini ayırt etmeye yardımcı olduğu için kan hücresi tiplerini ayırt etmek için kullanılır. Sonuç olarak, beyaz kan hücresi sayılarını gözlemleyerek enfeksiyonlar teşhis edilebilir. Leke, kırmızı renkli bir eozin ve metilen mavisi boyaların bir karışımıdır. Wright'ın lekesi, ışık mikroskopları altında idrar örneklerini, periferik kan lekelerini ve kemik iliği aspiratlarını lekelemek ve gözlemlemek için kullanılır. Wright'ın lekesi, çeşitli hastalıkların ve sendromların teşhisini desteklemek için sitogenetikteki kromozomların boyanmasında kullanılır. Wright'ın lekesi ile boyanan idrar örnekleri, idrar yolu enfeksiyonunu gösteren eozinofilleri tanımlar.
Resim 02: Wright Leke
Wright'ın leke işleminde, havada kurutulmuş bir kan filmi hazırlanır ve Wright lekesi uygulanır ve 3 dakika bekletilir. Daha sonra, eşit miktarda lekenin tamponu eklenir, hafifçe karıştırılır ve 5 dakika bekletilir. Slayt yatay olarak tutulur ve nötr damıtılmış su ile iyice yıkanır. Son olarak, kurutulur ve mikroskop altında gözlemlenir.
Giemsa Stain ve Wright Stain | |
Giemsa boyası öncelikle bakteri hücrelerinin ve ayrıca insan hücrelerinin boyanmasında kullanılan diferansiyel boyama tekniğidir.. | Wright lekesi, öncelikle kan yaymalarının, idrar örneklerinin ve kemik iliği aspiratlarının boyama prosedürlerinde kullanılan diferansiyel boyama tekniğidir.. |
Boyama, mikroskopik görüntünün kontrastını arttırmak için kullanılan mikroskopi sırasında kullanılan önemli bir laboratuvar tekniğidir. Giowsa lekesi ve Romanowsky lekeleri olarak bilinen Wright Leke, diferansiyel beyaz kan hücresi sayımlarının yapılmasını ve kırmızı kan hücrelerinin hücre morfolojisinin incelenmesini içerir. Oksitlenmiş metilen mavisi, eozin Y ve masmavi B boyaları, Romanowsky lekelerinin önemli bileşenleridir. Öncelikle, Giemsa boyası bakteri hücrelerinin boyanması sırasında kullanılır, ancak insan hücreleri için de kullanılabilir. Wright boyama, kan yaymalarının, idrar örneklerinin ve kemik iliği aspiratlarının boyanmasında yaygın olarak kullanılır. Bu Giesma boyası ile Wright boyası arasındaki farktır.
Bu makalenin PDF sürümünü indirebilir ve alıntı notuna göre çevrimdışı amaçlar için kullanabilirsiniz. Lütfen PDF sürümünü buradan indirin Giemsa Stain ve Wright Stain Arasındaki Fark
1. Barcia, J J. “Giemsa lekesi: tarihi ve uygulamaları.” Uluslararası cerrahi patoloji dergisi., ABD Ulusal Tıp Kütüphanesi, Temmuz 2007, Burada bulunabilir. Erişim tarihi: 12 Eylül 2017
2. Krafts, KP ve SE Pambuccian. “Sitopatolojide Romanowsky boyama: tarih, avantajlar ve sınırlamalar.” Biyoteknik ve histokimya: Biyolojik Leke Komisyonunun resmi yayını., ABD Ulusal Tıp Kütüphanesi, Nisan 2011, Burada bulunabilir. Erişim tarihi: 12 Eylül 2017
1. “Trypanosoma-evansi-rat-blood-Giemsa-stain” Alan R Walker tarafından - Commons Wikimedia üzerinden kendi çalışması (CC BY-SA 3.0)
2. “Mast Hücresi, Kemik İliği Aspirasyonu, Wright Leke (5916735712)” Houston, TX, ABD'den Ed Uthman tarafından - Mast Hücresi, Kemik İliği Aspirasyonu, Wright StainCammons Wikimedia üzerinden CFCF (CC BY 2.0)