HPLC ve Hızlı HPLC Arasındaki Fark

temel fark HPLC ve hızlı HPLC arasında HPLC için kullandığımız pompa basıncı 40 MPa civarında iken hızlı HPLC için pompa basıncı 3-5 MPa civarındadır.

Bir karışımın bileşenlerini ayırmak için kullandığımız en yaygın teknik “sıvı kromatografisidir”. Bu amaca ulaşmak için HPLC'nin çok popüler olduğu çeşitli teknikler vardır. HPLC, bir sıvı karışımın bileşenlerini hızlı ve verimli bir şekilde tanımlayan, ölçen ve ayıran Yüksek Performanslı Sıvı Kromatografisi anlamına gelir. Hızlı HPLC, geç çözüm çalışmalarına katılanların dikkatini çeken HPLC'nin özel bir uygulamasıdır..

İÇİNDEKİLER

1. Genel Bakış ve Temel Fark
2. HPLC nedir
3. Hızlı HPLC nedir
4. Yan Yana Karşılaştırma - Tablo Şeklinde HPLC ve Hızlı HPLC
5. Özet

HPLC nedir?

HPLC yüksek performanslı sıvı kromatografisidir. Solventleri bir kolondan geçmeleri için itmek için yüksek bir basınç kullanır. Ayrıca, amino asitler, nükleik asitler, karbonhidratlar, steroidler, antibiyotikler ve hidrokarbonlar gibi çeşitli bileşikleri ayırmak ve incelemek için ideal bir yoldur. HPLC, daha yüksek çözünürlük ve daha hızlı analiz gibi diğer karışım ayırma yöntemlerine göre birçok avantaja sahiptir. Yeniden paketleme ve rejenerasyon ihtiyacını ortadan kaldırır ve parametreler üzerinde daha iyi kontrol sağlar ve böylece ayırma verimliliğini arttırır. İdeal olarak, HPLC çok küçük parçacıkları ayırabildiği ve çözücülerin kolayca akmasını kolaylaştıran yüksek basınçların kullanılmasına izin verdiği için büyük ölçekli uygulamalar için uygundur.

Şekil 01: HPLC Sütunu

Kısacası, HPLC tekniğinin çalışma yöntemi aşağıdaki gibidir. İlk olarak, bir pompa kullanarak numuneyi hareketli faz akışına ayrık küçük miktarlarda eklemeliyiz. Pompa basıncı 40 MPa'da tutulmalıdır. Bu mobil faz akışı, HPLC kolonundan süzülür. Daha sonra numunedeki bileşenler de sütundan geçer. Bununla birlikte, örnek bileşenleri ile kolon içindeki adsorban arasındaki etkileşimlerdeki farktan dolayı hareket hızları birbirinden farklıdır. Bu adsorbanı sabit faz olarak adlandırırız çünkü sütun içinde bulunur (hareket etmez). Ardından, sütunun sonunda, sütundan elüte edilen numuneyi toplayabiliriz, böylece numunedeki bileşenleri ayrı olarak toplayabiliriz.

Hızlı HPLC Nedir?

Son zamanlarda, Schering Plough araştırma enstitüsündeki araştırma bilim adamları, bileşiklerin bir karışımdan daha da hızlı ayrılmasını sağladığından, HPLC'nin gelişmiş bir versiyonu olan hızlı bir HPLC tekniği geliştirdi. Ayrıca, hızlı HPLC olarak bilinen bu teknik, 0.5um gözenekli silika katı bir silis parçacığı üzerinde birleştirilerek hazırlanan 2.7um erimiş bir çekirdek silika parçacıklarından yararlanır. Bu benzersiz parçacıklar ayırma prosedürünü HPLC'de kullandığımızdan çok daha hızlı ve düşük geri basınçta yapar.

Resim 02: FPLC Aparatı

Hızlı HPLC sonuçları UPLC ile karşılaştırılabilir, ancak bilim adamları bu tekniğin çok pahalı ultra yüksek basınçlı ekipman gerektirmediği için üstün olduğunu düşünmektedir. Harika olan, hızlı HPLC'nin yeni laboratuvar protokolleri gerektirmemesidir..

HPLC ve Hızlı HPLC Arasındaki Fark Nedir??

HPLC, yüksek performanslı sıvı kromatografisidir ve hızlı HPLC, yüksek performanslı sıvı kromatografinin gelişmiş bir şeklidir. HPLC ve hızlı HPLC arasındaki temel fark, HPLC için kullandığımız pompa basıncının 40 MPa civarında olmasıdır. Oysa hızlı HPLC için pompa basıncı yaklaşık 3-5 MPa'dır. Ayrıca, hızlı HPLC tekniği esas olarak proteinlerin ayrılması için kullanılırken, amino asitler, nükleik asitler, karbonhidratlar, steroidler, antibiyotikler ve hidrokarbonlar gibi farklı bileşikleri HPLC tekniği ile ayırabiliriz..

Aşağıdaki grafikte HPLC ile hızlı HPLC arasındaki fark hakkında daha fazla bilgi sunulmaktadır.

Özet - HPLC vs Hızlı HPLC

HPLC, tüm dünyada çok popüler hale gelen bir sıvı kromatografisi tekniğidir. Hızlı HPLC, HPLC'nin yeni bir versiyonudur, Schering Plough Institute'daki araştırma bilim adamları bu yeni tekniği geliştirdiler. HPLC ve hızlı HPLC arasındaki temel fark, ayırma için kullandığımız pompa basıncında yatmaktadır. Yani; HPLC için kullandığımız pompa basıncı yaklaşık 40 MPa'dır. Ancak, hızlı HPLC için pompa basıncı yaklaşık 3-5 MPa'dır.

Referans:

1. “Yüksek Performanslı Sıvı Kromatografisi.” Vikipedi, Wikimedia Vakfı, 20 Ekim 2018. Buradan erişebilirsiniz 
“Hızlı HPLC Çalıştırmak İçin Süslü Bir Sisteme İhtiyacınız Var mı?” Hızlı HPLC - CHROMacademy. Burada mevcut  

Görünüm inceliği:

1. ”HPLC kolom” Kapı Jmave, rcvanwijk - Eigen werk, (Public Domain) Commons Wikimedia üzerinden  
2. ”Lab's FPLC” Dallas, TX, ABD'den Stephen Helms tarafından - Commons Wikimedia aracılığıyla Laboratuarımızın FPLC'si (CC BY-SA 2.0)