temel fark HPLC ve UPLC arasında HPLC, boyutları 5 mikrometre civarında olan parçacıkların analizine izin verirken, UPLC, 2 mikrometre civarında çok daha küçük parçacıklara izin verir.
HPLC ve UPLC'nin her ikisi de, bir bileşiğin bileşenlerinin ayrılmasında yararlı olan Sıvı Kromatografik tekniklerdir. HPLC ve UPLC arasındaki farkı bilmek için önce HPLC'nin ne olduğunu bilmemiz gerekir. Çünkü UPLC, HPLC'nin özel bir versiyonudur ve HPLC'nin ne olduğunu biliyorsak bunu kolayca anlayabiliriz.
1. Genel Bakış ve Temel Fark
2. HPLC nedir
3. UPLC nedir
4. Yan Yana Karşılaştırma - Tablo Şeklinde HPLC vs UPLC
5. Özet
HPLC terimi Yüksek Performans anlamına gelir Sıvı kromatografisi. Bir bileşiğin farklı bileşenlerini ayırmak için kullanabileceğimiz bir tekniktir. Ayrıca, bir karışımın bileşenlerini tanımlamak, ölçmek ve ayırmak için en yaygın kullanılan tekniktir. Ayrıca, bu teknik solventleri kolon boyunca itmek için yüksek bir basınç kullanır. Ayrıca, HPLC'nin başlıca uygulamaları, bir bileşiğin bileşenlerinin analizi için biyokimyadadır. Amino asitler, nükleik asitler, proteinler, hidrokarbonlar, böcek ilaçları, karbonhidratlar, antibiyotikler, steroidler ve sayısız diğer inorganik maddenin ayrılması ve tanımlanması için ideal bir yoldur.
Şekil 01: Laboratuardaki HPLC Sistemi
Kısacası, HPLC tekniğinin çalışma yöntemi aşağıdaki gibidir. İlk olarak, bir pompa kullanarak numuneyi hareketli faz akışına ayrık küçük miktarlarda eklemeliyiz. Pompa basıncı 40 MPa'da tutulmalıdır. Daha sonra, bu mobil faz akışı HPLC kolonundan süzülür. Ayrıca, numunedeki bileşenler sütundan geçer. Bununla birlikte, hareket hızları birbirinden farklıdır. Bu fark, numune bileşenleri ile kolon içindeki adsorban arasındaki etkileşimlerdeki farktan kaynaklanmaktadır. Bu adsorbanı sabit faz olarak adlandırırız çünkü sütun içinde bulunur (hareket etmez). İkincisi, sütunun sonunda, sütundan elüte edilen numuneyi toplayabiliriz. Burada numunedeki her bileşen için tutma sürelerindeki farklılıkları belirleyebiliriz.
UPLC terimi, Ultra Yüksek Performanslı Sıvı Kromatografisi. HPLC'nin bir varyasyonudur, ancak çalışma yöntemi aynıdır. Bununla birlikte, HPLC'den farklı olarak, bu yöntem 2 mikrometre küçük parçacık gibi çok küçük parçacıkların analiz edilmesine izin verir.
Resim 02: UPLC Cihazı
Dahası, daha hızlı bir analiz sağlar. Bu teknikte, numunenin kolona sokulması için 100 MPa'lık bir pompa basıncı kullanıyoruz. Dolayısıyla, bu yüksek basınç tüm numunenin kolona verildiğini doğrular. Bu nedenle, bu HPLC'ye göre çok etkilidir.
HPLC terimi Yüksek Performanslı Sıvı Kromatografisi anlamına gelirken, UPLC terimi Ultra Yüksek Performanslı Sıvı Kromatografisi anlamına gelir. Bu nedenle, UPLC tekniği HPLC'nin geliştirilmiş bir versiyonudur. Böylece, çalışma yöntemi her iki teknik için de aynıdır. Bununla birlikte, UPLC, yüksek bir pompa basıncı kullandığı için HPLC'ye göre daha verimlidir; HPLC için pompa basıncı 40 MPA, UPLC için 100 MPa'dır. Bu nedenle, bu HPLC ve UPLC arasındaki bir farktır. Her şeyden önce, HPLC ve UPLC arasındaki temel fark, HPLC'nin boyutu 5 mikrometre civarında olan parçacıkların analizine izin verirken, UPLC 2 mikrometre civarında çok daha küçük parçacıklara izin verir.
UPLC, bir HPLC formudur. Böylece işlem yöntemleri aynıdır. Ancak, UPLC'de HPLC'ye kıyasla bazı gelişmiş özellikler bulabiliriz. Bu nedenle, HPLC ve UPLC arasında bazı farklar vardır. Bununla birlikte, HPLC ve UPLC arasındaki temel fark, HPLC'nin boyutu 5 mikrometre civarında olan parçacıkların analizine izin verirken, UPLC 2 mikrometre civarında çok daha küçük parçacıklara izin vermesidir..
1. “Yüksek Performanslı Sıvı Kromatografisi.” Vikipedi, Wikimedia Vakfı, 20 Ekim 2018. Buradan erişebilirsiniz
2. “UPLC.” Vikipedi, Wikimedia Vakfı, 25 Ekim 2017. Buradan erişebilirsiniz
1. ”Hplc” Commons Wikimedia üzerinden Kjaergaard tarafından Vikipedi (Public Domain) Wikipedia'da
2. ”UPLC cihazının resmi” Groep29 BFW tarafından - Commons Wikimedia üzerinden kendi çalışması, (Public Domain)