In Situ Hibridizasyonu ile İmmünohistokimya Arasındaki Fark

Temel Fark - İmmünohistokimyaya Karşı In Situ Hibridizasyonu
 

Kanser ve bulaşıcı hastalık teşhisi, yeni proteomik ve genomik bazlı tekniklerin, tümörlerin veya bulaşıcı hücrelerin, çoğalmasının ve hücre gelişim bölgelerinin tanımlanması ve bulaşıcı ve bulaşıcı olmayan hastalıkların genetik temelini analiz etmek için kullanıldığı popüler bir eğilimdir. Bu, doğru ilaç işleme ve tasarımına ve hastalıklar için özelleştirilmiş tedavilerin geliştirilmesine yol açacaktır. Yerinde hibridizasyon (ISH) ve İmmünohistokimya (IHC) kanser biyolojisinde yaygın olarak kullanılan iki tekniktir ve yerinde hibridizasyon ile immünokimya arasındaki temel fark analiz prosedüründe kullanılan moleküllerde yatmaktadır.. ISH'de nükleik asit probları analizde kullanılırken, IHC'de, teşhis tayinleri için monoklonal ve poliklonal antikorlar kullanılır..

İÇİNDEKİLER

1. Genel Bakış ve Temel Fark
2. In Situ Hibridizasyonu Nedir
3. İmmünohistokimya nedir
4. In Situ Hibridizasyonu ve İmmünohistokimya Arasındaki Benzerlikler
5. Yan Yana Karşılaştırma - Tablo Formunda İmmünohistokimyaya Karşı In Situ Hibridizasyonu
6. Özet

In Situ Hibridizasyonu (ISH) nedir?

Yerinde hibridizasyon, dokunun tamamında veya bir kısmında, tüm dokuda veya hücrelerde doğrudan gerçekleştirilen bir nükleik asit hibridizasyon tekniğidir. Teknik, Watson Crick tamamlayıcı baz eşleştirme teorisine bağlıdır, bu da mutasyona uğramış genleri tespit edebilen veya ilgilenilen gerekli geni tanımlayabilen DNA-DNA hibritleri veya DNA-RNA hibritleri ile sonuçlanır. Hibridizasyon tekniği sırasında problar olarak tek sarmallı DNA sekansları, çift sarmallı DNA sekansları, tek sarmallı RNA sekansları veya sentetik oligonükleotit sekansları kullanılır ve bu problar, otoradyografi üzerine tanımlama prosedürleri için 5 'ucunda bir radyoaktif fosfor ile etiketlenir veya floresan boyalar kullanılarak etiketlenir . Kullanılan prob tipine ve izlenen görüntüleme tekniğine bağlı olarak farklı ISH teknikleri mevcuttur..

Şekil 01: Floresan In Situ Hibridizasyonu

ISH'nin, esasen bulaşıcı hastalıkların moleküler teşhisinde, patojenlerin varlığını tanımlamak ve patojeni moleküler teşhis yoluyla doğrulamak için birçok uygulaması vardır. Ayrıca gelişim biyolojisi, karyotipleme ve filogenetik analiz ve kromozomların fiziksel haritalanması alanlarında da kullanılır..

İmmünohistokimya (IHC) nedir?

IHC tekniğinde, analiz edilen ana molekül antijendir. IHC sırasında, enfeksiyon veya malign hücre proliferasyon durumu üzerine antijenlerin varlığını belirlemek için monoklonal ve poliklonal antikorlar kullanılır. Teknik, antijen-antikor bağlanmasına dayanır ve bu teknik için enzim etiketleri kullanılır; böyle bir uygulama ELISA'dır (Enzime bağlı immünosorban testi). İşaretleyiciler ayrıca floresan etiketli antikorlar veya radyo etiketli antikorlar olabilir.

Resim 02: İmmünohistokimya

IHC, kanser hücresi tespiti için yaygın olarak kullanılmaktadır. Teşhis prosedürleri, tümörü tanımlamak ve karakterize etmek için tümör hücrelerinde bulunan antijenleri hedefler. Enfeksiyon ajanlarını teşhis etmek için aynı prosedür dahil edilmiştir. Monoklonal ve Poliklonal antikorlar ayrıca, istenen protein ve uygulanan sentetik antikor arasındaki antikor-antijen bağlanma reaksiyonunu mümkün kılarak farklı gen ürünlerini analiz etmek için kullanılır..

In Situ Hibridizasyonu ile İmmünohistokimya Arasındaki Benzerlikler Nelerdir??

• ISH ve IHC oldukça spesifik reaksiyonlardır.
• Her iki teknik de son derece hassas.
• Her iki teknik de kanser ve bulaşıcı hastalıkların teşhisinde kullanılabilir.
• Bu teknikler steril in vitro ortamlarda gerçekleştirilir.
• Her ikisi de tekrarlanabilir sonuçlar sağlayan hızlı tekniklerdir.
• ISH ve IHC radyo etiketleme ve floresans teknikleri gibi algılama yöntemlerini kullanır.

In Situ Hibridizasyonu ile İmmünohistokimya Arasındaki Fark Nedir??

In Situ Hibridizasyonu ve İmmünohistokimya
ISH, dokunun bir kısmı veya bölümü veya tüm doku üzerinde doğrudan gerçekleştirilen bir nükleik asit hibridizasyon tekniğidir.	IHC, hücre yüzeylerine yerleştirilen özel protein markerleri olan antijenlerin varlığını belirlemek için monoklonal ve poliklonal antikorların kullanıldığı bir tekniktir.
Analiz Edilen Biyo Molekül Tipleri
ISH nükleik asitleri analiz eder.	ESK protein-antijenleri analiz eder.
Biyokimyasal Reaksiyonun Temeli
Bu teknikte DNA-DNA veya DNA-RNA arasında tamamlayıcı baz eşleşmesi meydana gelir.	Antijen-antikor etkileşimleri immünohistokimyada rol oynar.
Enzime Bağlı Tespit Yöntemleri
Enzim bağlantılı algılama yöntemleri ISH'de kullanılamaz.	IHC'de enzime bağlı tespit yöntemleri kullanılabilir.

Özet - In Situ Hibridizasyonu vs İmmünohistokimya

Moleküler tanı, kanser veya bulaşıcı olmayan bir hastalığı veya HIV veya Tüberküloz gibi bulaşıcı bir hastalığı tanımlamak için kullanılabilecek hızlı ve doğrulayıcı yöntemlerdir. Moleküler markörler, bu tekniklerle ilgili yüksek bir maliyet bulunmasına rağmen, verimliliği arttırmak ve daha az zahmetli olmak üzere farklı yeni tekniklerin sokulduğu temelde eksprese edilen proteinler formunda veya genetik düzeyde mevcut olabilir. Bu nedenle ISH, DNA-DNA veya DNA-RNA hibrid oluşumuna bağlıdır ve IHC, antikor ve antijen arasındaki spesifik reaksiyonlara bağlıdır. Bu, yerinde hibridizasyon arasındaki farktır.

İmmünohistokimya vs In Situ Hibridizasyon PDF Versiyonu indirin

Bu makalenin PDF sürümünü indirebilir ve alıntı notuna göre çevrimdışı amaçlar için kullanabilirsiniz. PDF versiyonunu buradan indirebilirsiniz. In Situ Hibridizasyon ve İmmünohistokimya Arasındaki Fark.

Referanslar:

1. Duraiyan, Jeyapradha ve ark. “İmmünohistokimya uygulamaları.” Eczacılık ve Biyolojik Bilimler Dergisi, Medknow Publications & Media Pvt Ltd, Ağustos 2012, Buradan ulaşabilirsiniz. Erişim tarihi: 24 Ağu 2017.
2. “In Situ Hibridizasyonu (ISH).” Ulusal Biyoteknoloji Bilgi Merkezi, ABD Ulusal Tıp Kütüphanesi, buradan ulaşabilirsiniz. Erişim tarihi: 24 Ağu 2017.

Görünüm inceliği:

1. “BALIK (Floresan In Situ Hibridizasyonu)” MrMatze - Commons Wikimedia üzerinden kendi çalışması (CC BY-SA 3.0)
2. “Immunohistochemicalstaining2” Commons Wikimedia üzerinden Wikipedia'da Imoen (CC BY-SA 3.0) tarafından