DNA polimerazlar, moleküler biyoloji tekniklerinde yaygın olarak kullanılan enzimlerdir ve ayrıca DNA replikasyonu yapılan tüm organizmalarda doğal olarak bulunurlar. Bunlar replikasyon sırasında yer alan anahtar polimerize edici enzimlerdir. DNA polimeraz, DNA ipliğinin serbest 3 'ucuna nükleotidler ekleyebilir ve böylece yeni bir ipliğin uzamasına neden olabilir. Günümüzde, hastalık teşhisinde ve endüstriyel uygulamalarda moleküler biyolojinin gelişmesi nedeniyle, çeşitli yararlı özelliklere sahip polimerazların üretilmesi önemlidir. Bu yöntemin doğruluğunu artırır ve daha hızlı bir teknik yapar. Phusion ve Taq polimeraz, özel moleküler uygulamalarda kullanılan, ticari olarak üretilen iki ısıya dayanıklı polimeraz enzimidir. Füzyon, izole edilmiş bir DNA polimerazdır Pyrococcus furiosus ve aslına uygunluğu artırmak için deneyleri klonlamada kullanılır. Taq DNA Polimeraz, Polimeraz Zincir Reaksiyonunda (PCR) kullanılan standart DNA polimerazdır ve termostabil bakteriden izole edilir; Thermus aquaticus. temel fark iki enzim arasında kaynak mikroorganizma. Füzyon ekstremofilden izole edilir, Pyrococcus furiosus oysa Taq polimeraz termofilden izole edilir., Thermus aquaticus.
1. Genel Bakış ve Temel Fark
2. Phusion nedir
3. Taq Polimeraz nedir
4. Phusion ve Taq Polimeraz Arasındaki Benzerlikler
5. Yan Yana Karşılaştırma - Tablo Şeklinde Phusion vs Taq Polimeraz
6. Özet
Phusion DNA polimeraz enzimi, enzimi izole etmek suretiyle üretilen yeni bir polimerazdır. Pyrococcus furiosus, ekstremofilik bir Archaea. Bu mikroplar son derece yüksek sıcaklık koşullarında bulunur, böylece polimerazı yüksek ısıya dayanıklı bir polimeraz yapar. Füzyon polimeraz, geleneksel termostabil polimeraz üzerinde aşırı sadakat elde etmek için kullanılır; Taq polimeraz. Phusion polimeraz, 7.5kb genomik DNA'ya kadar uzun şablonları çoğaltma yeteneğine sahiptir. Phusion polimerazın optimal polimerizasyon kapasitesi 720 C. Phusion aynı zamanda sekanslama, ekspresyon analizi ve mutasyon analizi için ürünleri klonlamada kullanılır.
Füzyon DNA polimeraz, 3 '- 5' ekzonükleaz aktivitesine sahiptir. Bu, sentezden sonra yeni sentezlenmiş ipliğin yeniden işlenmesine izin verir. Bu nedenle, nükleotit uyuşmazlıkları kolayca onarılabilir. Bu nedenle, daha düşük bir hata oranına sahiptir. Phusion polimerazın genel avantajları;
Resim 01: Füzyon
Phusion polimerazın ana dezavantajı, deoksiüridin trifosfat (dUTP) varlığında inhibe edilmesidir. DUTP'ler reaksiyon karışımında biriktiğinde, Phusion polimerazın etkilerini inhibe edebilir. Bu, enzim ilave edilmeden önce reaksiyon karışımının dUTPase ile işlenmesiyle önlenir. Şu anda, bu soruna bir çözüm olarak Phusion polimeraz yerine Pfu Turbo olarak bilinen bir DUTP dirençli Phusion polimeraz varyantı kullanılmaktadır..
Taq DNA polimeraz buluş moleküler biyoloji alanında devrim yaratmıştır. DNA amplifikasyonunda önemli bir sorunu çözdü. Taq DNA polimeraz, termofilik bakteriden ekstrakte edilen ve izole edilen ısıya dayanıklı bir polimeraz enzimidir, Thermus aquaticus. Bu enzimlerin keşfi, PCR'nin gelişmesine yol açar. Bu enzim, geleneksel zahmetli klonlama teknikleri yerine DNA amplifikasyonunda polimeraz zincir reaksiyonunun kullanılmasına izin vermiştir. PCR şimdi tekniğe birçok yeni varyasyon eklenmiş olarak moleküler teşhis, tarım ve sanayi alanlarında kullanılmaktadır.
Resim 02: Taq Polimeraz
Taq DNA polimeraz 72 arasındaki optimum sıcaklık aralığında çalışır0C - 800C. Taq DNA polimeraz bir ko-faktör gerektirir; fonksiyonu için magnezyum. Taq polimeraz 3 '- 5' prova okuma yeteneğine sahip değildir, bu nedenle Taq DNA polimerazının hata oranı Phusion polimeraz vb. Gibi daha yeni DNA polimeraz türlerine kıyasla yüksektir. enzimin rahatlığı ve esnekliği nedeniyle bilim dünyasında aynı.
Phusion vs Taq Polimeraz | |
Füzyon, izole edilmiş bir DNA polimerazdır Pyrococcus furiosus ve aslına uygunluğu artırmak için deneyleri klonlamada kullanılır.. | Taq DNA Polimeraz, Polimeraz Zincir Reaksiyonunda (PCR) kullanılan standart DNA polimerazdır ve ısıya dayanıklı bakteriden izole edilir, Thermus aquaticus. |
Kaynak Organizma | |
Füzyon ekstremofilik arkinden çıkarılır - Pyrococcus furiosus. | Bu edebi eserler kolonizasyon döneminden sömürgecilik dönemine kadar uzanır.. |
İspat okuma yeteneği | |
Phusion'da 3 '- 5' kanıt okuma yeteneği mevcuttur. | Taq polimerazda 3 '- 5' kanıt okuma yeteneği yoktur. |
doğruluk | |
Phusion ile yüksek sadakat var. | Taq polimeraz düşük sadakat gösterir. |
Amplifikasyon | |
Phusion uzun DNA fragmanlarını çoğaltabilir. | Taq polimeraz, çok daha kısa DNA fragmanlarını amplifiye edebilir. |
dUTP Zehirlenmesi | |
Füzyon eylemi birikim tuhaflığı tarafından engellenir. | Taq polimeraz dUPT tarafından inhibe edilmez. |
Phusion ve Taq DNA polimeraz PCR tekniklerinde kullanılan ısıya dayanıklı iki polimerazdır. Füzyon, ekstremofilden izole edilmiş bir polimerazdır, Pyrococcus furiosus oysa Taq ısıya dayanıklı bakterilerden izole edilir Thermus aquaticus. Taq DNA polimeraz keşfi, PCR buluşuna yol açar. Phusion, Phusion'u yüksek sadakatli DNA üretiminde daha iyi bir seçenek haline getiren Taq'a göre birçok avantaja sahiptir. Bununla birlikte, Taq polimeraz hala PCR'de standart polimeraz enzimi olarak kullanılmaktadır. Phusion ve Taq polimeraz arasındaki fark budur.
1. Biolabs, New England. "Taq DNA Polimerazları." New England Biolabs: Yaşam Bilimleri Endüstrisi için Reaktifler. Burada mevcut
2. “Füzyon DNA Polimeraz.” New England Biolabs. Burada mevcut
Nivin Nasri'By NivinN tarafından gösterilen 1.'GAM - Kendi çalışması, (CC BY-SA 4.0) Commons Wikimedia üzerinden
2.'Taq'By Adenosine - Kendi çalışması, Commons Wikimedia üzerinden (CC BY-SA 3.0)