RP HPLC ve HIC Arasındaki Fark

temel fark RP HPLC ve HIC arasında RP HPLC daha polar bir mobil faz ve daha az polar bir sabit faz kullanır. Oysa HIC, hidrofobik moleküllerin ona bağlanmasına izin veren bir hidrofobik sabit faz kullanır.

Kromatografi, bir karışımı bileşenlerine ayırmaya yardımcı olan analitik bir tekniktir. İlk olarak, ayrılacak numuneyi bir çözeltiye eritmeliyiz. Bu çözelti-madde karışımına mobil faz denir. Daha sonra mobil faz, durağan faz adı verilen başka bir malzemeden geçirilir. Sabit faz bileşenlerin ayrılmasını belirler. Ayırma, malzemenin mobil faz ile sabit faz arasında bölünmesi nedeniyle gerçekleşir.

İÇİNDEKİLER

1. Genel Bakış ve Temel Fark
2. RP HPLC nedir
3. HIC nedir
4. Yan Yana Karşılaştırma - RP HPLC ve HIC Tabular Formunda
5. Özet

RP HPLC nedir?

RP HPLC terimi Ters Fazlı Yüksek Performanslı Sıvı Kromatografisi. Hidrofobikliğe göre bir karışımdaki bileşenlerin ayrılmasını içerir. Mobil fazdaki hidrofobik bileşenler, sabit fazdaki hareketsizleştirilmiş hidrofobik ligandlarla bağlantı kurarken, hidrofilik bileşenler, sabit fazın yüzeyine bağlanmadan sabit fazdan elüte edilir..

Şekil 01: HPLC Aparatı

Ayrıca, bu yöntem diğer kromatografik tekniklere kıyasla daha fazla tekrarlanabilirliğe sahiptir ve geniş uygulanabilirlik gösterir. Bu nedenle, bu yöntemi tüm HPLC yöntemlerinin% 75'inden fazlası için laboratuvarlarda kullanıyoruz. Çoğu zaman, mobil faz olarak karışabilir bir polar organik çözücü ile sulu bir su karışımı kullanırız. Böylece, çözeltideki hidrofobik bileşenlerin sabit fazın yüzeyine bağlanmasını sağlayacaktır..

HIC nedir?

HIC terimi, Hidrofobik Etkileşim Kromatografisi. Bu bir tür ters faz HPLC'dir ve bu yöntem esas olarak proteinler gibi büyük biyomoleküllerin ayrılması için kullanılır. Bu yöntemde, biyomolekülün örneğini yapmak için sulu bir ortam kullanmamız gerekir. Çünkü organik çözücüler proteinlerin denatürasyonuna neden olabilir. Ayrıca, bu teknik, sabit fazın hafif hidrofobik yüzeyine sahip büyük moleküller arasındaki etkileşimi kullanır. Ayrıca, numunede yüksek bir tuz konsantrasyonu kullanmalıyız çünkü proteinin ambalaj üzerinde tutulmasını teşvik eder; bu işleme tuzlama denir. Tuz konsantrasyonunu kademeli olarak azaltarak, biyomoleküllerin hidrofobikliklerine göre ayrı ayrı elütlerini yapabiliriz.

Genellikle, bu yöntem iyon değişim kromatografisinin aksine koşulları kullanır. Bu teknikte, ilk olarak numunedeki çözünen maddenin çözülmesini azaltmak için bir tampon çözeltisini kolondan geçirmemiz gerekir. Proteinin hidrofobik bölgelerini açığa çıkarır. Bununla birlikte, molekül daha hidrofobik olduğunda, bağlanmayı desteklemek için daha az tuz gereklidir. Burada önce daha az hidrofobik çözünenler elüe edilir ve tuz konsantrasyonundaki değişime göre en son hidrofobik çözünenler elüe edilir.

RP HPLC ve HIC Arasındaki Fark Nedir??

Kromatografi, bir karışımdaki bileşenlerin ayrılması için analitik bir tekniktir. RP HPLC ve HIC iki özel kromatografik tekniktir. RP HPLC ve HIC arasındaki temel fark, RP HPLC'nin daha polar bir mobil faz ve daha az polar sabit faz kullanmasıdır, oysa HIC, hidrofobik moleküllerin ona bağlanmasına izin veren bir hidrofobik sabit faz kullanır..

Aşağıdaki infografik, RP HPLC ve HIC arasındaki farkı özetler.

Özet - RP HPLC vs. HIC

Kromatografi, bir karışımdaki bileşenlerin ayrılması için analitik bir tekniktir. RP HPLC ve HIC iki özel kromatografik tekniktir. RP HPLC ve HIC arasındaki temel fark, RP HPLC'nin daha polar bir mobil faz ve daha az polar bir sabit faz kullanmasıdır, oysa HIC, hidrofobik moleküllerin ona bağlanmasına izin veren bir hidrofobik sabit faz kullanır..

Referans:

1. “HPLC Ayırma Modları.” Sular, Burada mevcuttur.

Görünüm inceliği:

1. “Hazırlayıcı HPLC” GYassineMrabetTalk & # x2709; Bu W3C belirtilmemiş vektör görüntüsü Inkscape ile oluşturuldu. - Commons Wikimedia üzerinden kendi çalışması (CC BY 3.0)