Transformasyona Karşı Dönüşüm
Transformasyon ve transfeksiyon, bir yabancı geni bir konakçı hücreye sokmak için kullanılan iki basit tekniktir. Bununla birlikte, bu teknikler konakçı veya vektör sistemlerinin tipine bağlıdır.
Hücre Dönüşümü Nedir?
Dönüşüm, genleri maya ve bakteri hücrelerine sokmak için kullanılan tekniktir. Bu teknik genellikle genlerde kalıtsal değişikliklere neden olur ve bu nedenle genin ifadesi kalıcıdır. Bakteriyel dönüşüm ilk olarak 1928'de Frederick Griffith tarafından tanıtıldı. Sonra 1970'lerin başında, bu teknik E. coli. Dönüşüm sürecinde E. coli, hücreler buz gibi soğuk CaCl çözeltisine batırılır2. Bu adım E.coli yetkili hücreler. Bundan sonra, yetkili hücreler plazmid DNA ile karıştırılır ve buz üzerinde 20-30 dakika inkübe edilir. Daha sonra DNA'nın hücreye transferini sağlamak için kısa bir ısı şoku verilir. Son olarak, hücreler bir besin suyuna yerleştirilir ve plazmidleri oluşturmak için 37 ° C'de 60-90 dakika inkübe edilir. Bu adımlar başarıyla tamamlandıktan sonra, dönüştürülmüş hücreler hücrelerin yayılması için uygun bir ortama yerleştirilebilir. Dönüşüm verimsiz bir teknik olarak kabul edildiğinden, klon bankalarının hazırlanması için kullanılamaz.
Hücre Transfeksiyonu Nedir?
Transfeksiyon, yabancı bir genin genellikle memeli hücrelerine sokulması için bir yöntemdir. İki transfeksiyon yöntemi vardır; yani geçici transfeksiyon ve stabil transfeksiyon. Geçici transfeksiyonda, gen ekspresyonu sınırlı bir süre için mevcuttur; böylece genin değişmesi geçici ekspresyona neden olur. Bu transfeksiyon yöntemi basit ve hızlıdır; dolayısıyla rutin olarak kullanılabilir. Geçici transfeksiyonun bir dezavantajı, büyük ölçekli protein sentez sistemlerine başvurmanın zorluğudur..
Kararlı transfeksiyon sırasında, bir hedef gen konakçı hücrenin genomuna entegre edilir ve bu nedenle geçici transfeksiyonun aksine gen ifadesi kalıcıdır..
Dönüşüm ve Transfeksiyon arasındaki fark nedir?
• Transformasyon, bir genin bir prokaryotik hücreye (bakteriyel ve maya) sokulmasıdır, buna karşılık transfeksiyon genellikle bir genin memeli hücresine sokulması olarak adlandırılır.
• Transformasyon, genlerde kalıtsal değişim ile sonuçlanırken transfeksiyon, geçici ekspresyona veya genlerde kalıcı değişikliklere neden olabilir.