temel fark agar kuyusu ile disk difüzyon yöntemi arasında agar kuyusu difüzyon yönteminde, ekstrakt çözeltisi agar ortamı üzerinde oluşturulan bir deliğe veya bir kuyucuğa doldurulurken agar disk difüzyon yönteminde, agar yüzeyine test çözeltisini içeren bir filtre kağıdı diski yerleştirilir.
Mikroorganizmalar birçok hastalığın ajanıdır. Mikroorganizmaları öldüren ve büyümelerini engelleyen veya durduran farklı antimikrobiyal ajanlar vardır. Antimikrobiyal aktivitenin saptanması için çeşitli tarama ve değerlendirme yöntemleri mevcuttur. Bunlar arasında, agar kuyu difüzyon yöntemi ve agar disk difüzyon yöntemleri, laboratuvar ortamında agar difüzyon yöntemleri olan analizler. Bu yöntemler, belirtilen ekipman ve tekrarlanabilirlik ve standardizasyon için daha fazla değerlendirme gerektirmedikleri için yaygın olarak kullanılmaktadır. Her iki yöntem de antimikrobiyal ajanın agar ortamı yoluyla difüzyonuna bağlıdır..
1. Genel Bakış ve Temel Fark
2. Agar Kuyu Difüzyon Yöntemi nedir
3. Agar Disk Difüzyon Yöntemi nedir
4. Agar Kuyusu ve Disk Difüzyon Yöntemi Arasındaki Benzerlikler
5. Yan Yana Karşılaştırma - Tablo Şeklinde Agar Well vs Disk Difüzyon Yöntemi
6. Özet
Agar kuyu difüzyon yöntemi en ucuz ve en kolay yöntemlerden biridir laboratuvar ortamında antimikrobiyal aktivite testleri. Bu yöntem kullanılarak, bitki ekstreleri ve mikrobiyal ekstreler patojenik mikrobiyal türlere karşı antimikrobiyal aktivite açısından taranabilir. Bu yöntemde, bir agar plakası, yayılma plakası tekniği kullanılarak patojenik bir bakteriyel tür tarafından aşılanır. Bu, bilinen bir hacimdeki mikrobik çözeltinin agar yüzeyi üzerine bir cam yayıcı kullanılarak yayılmasıyla yapılır. Daha sonra steril bir mantar delici ile aseptik olarak bir delik veya bir kuyu (6 ila 8 mm çapında) oluşturulur. Daha sonra, kuyu ekstrakt çözeltisi (test çözeltisi) ile doldurulmalı ve daha sonra plakalar uygun bir sıcaklıkta ve uygun koşullarda inkübe edilmelidir. İnkübe edildiğinde, antimikrobiyal ekstrakt çözeltisi yavaş yavaş agar ortamından yayılır ve test edilen bakteri türlerinin büyümesini engeller. Son olarak, inhibisyon bölgesi gözlemlenebilir ve bölgenin çapı bir ölçüm olarak alınır.
Agar kuyu difüzyon yöntemine benzer şekilde, agar disk difüzyon yöntemi de laboratuvarlarda rutin olarak kullanılan bir antimikrobiyal duyarlılık test yöntemidir. Bu yöntemde, test çözeltisini içeren bir filtre kağıdı diski agar ortamında tutulur. Bundan önce, agar plakası test mikroorganizması ile aşılanmalıdır. Daha sonra bilinen bir ekstre çözeltisi konsantrasyonunu içeren filtre kağıdı diski, agar ortamına yerleştirilir. Sonra plakalar uygun koşullar altında inkübe edilir.
Resim 02: Agar Disk Difüzyon Yöntemi
İnkübe edildiğinde, özüt çözeltisi agar ortamından difüze olur ve mikrobiyal büyümeyi engeller. İnkübasyondan sonra, inhibisyon bölgesinin çapı ölçülür ve karşılaştırılır.
Agar kuyusu difüzyon yöntemi, agar ortamında bir delik oluşturulduğu ve buna ekstrakt çözeltisinin eklendiği antimikrobiyal aktivite testidir. Bu arada, agar disk difüzyon yöntemi, bilinen özüt çözeltisi konsantrasyonunu içeren bir filtre kağıdı diskinin agar ortamına yerleştirildiği bir antimikrobiyal aktivite testidir. Bu, agar kuyusu ile disk difüzyon yöntemi arasındaki temel farktır. Bu nedenle, özüt çözeltisi, ağar kuyusu difüzyon yönteminde ağar kuyusuna veya deliğine eklenirken, özüt çözeltisi, ağar disk difüzyon yönteminde filtre kağıdı diskine eklenir. Bu nedenle, agar kuyu difüzyon yöntemi filtre kağıdı diskini kullanmazken agar disk difüzyon yöntemi agar ortamında agar delikleri oluşturmaz.
Daha önce agar kuyusu ile disk difüzyon yöntemi arasındaki farkın yan yana karşılaştırılması.
Agar kuyusu ve disk difüzyon yöntemleri iki tip antimikrobiyal duyarlılık test yöntemidir. Her iki yöntem de basit ve düşük maliyetli in vitro yöntemlerdir. Agar, kuyu difüzyon yönteminde, ortam üzerinde bir delik veya kuyu oluşturulur ve daha sonra antimikrobiyal aktiviteyi değerlendirmek için kuyuya ekstrakt çözeltisi eklenir. Aksine, agar disk difüzyon yönteminde, özüt çözeltisi bir filtre kağıdı diskine eklenir ve daha sonra agar yüzeyine yerleştirilir. Yani, bu agar kuyusu ve disk difüzyon yöntemi arasındaki temel farktır.
1. Balouiri, Mounyr, vd. “İn Vitro Antimikrobiyal Aktiviteyi Değerlendirme Yöntemleri: Bir Gözden Geçirme.” Farmasötik Analiz Dergisi, Elsevier, 2 Aralık 2015,.
1. “Agar Difüzyon Metodu 1” Sommer36 - Commons Wikimedia üzerinden kendi çalışması (CC BY-SA 4.0)