temel fark klonlama vektörü ile ifade vektörü arasında ekspresyon vektörü genlerin proteinlere ekspresyonunu kolaylaştırırken klonlama vektörü konakçı hücreye yabancı bir DNA parçası taşır.
Vektör moleküler biyolojide önemli bir terimdir. Rekombinant DNA teknolojisinde, bir vektörün ana rolü, bir konakçı hücreye sokulacak faydalı bir DNA fraksiyonuna bir taşıma modu sağlamaktır. Ayrıca, yabancı bir DNA fragmanını yapay olarak eksprese edilecek veya çoğaltılacak bir konakçı hücreye taşımak için kullanılan bir DNA molekülüdür. En çok kullanılan vektörler plazmidler, viral vektörler, kozmidler ve yapay kromozomlardır. Klonlama vektörü ve ekspresyon vektörü, uygulamalarına göre sınıflandırılmış iki tip vektördür.
1. Genel Bakış ve Temel Fark
2. Klonlama Vektörü nedir
3. İfade Vektörü Nedir?
4. Klonlama Vektörü ve İfade Vektörü Arasındaki Benzerlikler
5. Yan Yana Karşılaştırma - Sekmeli Formda İfade Vektörüne Karşı Klonlama Vektörü
6. Özet
Bir klonlama vektörü, yabancı bir DNA molekülünün sokulması için kullanılabilen ve klonlama amacıyla bir konakçı içine sokulabilme özelliğine sahip bir DNA fraksiyonudur. Bir klonlama vektörünün ideal bir özelliği, sınırlayıcı enzim muamelesi ve ligasyon enzim muamelesi ile DNA fragmanının kolayca sokulması / çıkarılmasıdır. Bu açıdan, sık kullanılan klonlama vektörleri genetik olarak tasarlanmış plazmidlerdir.
Şekil 01: Klonlama Vektörü
Bir klonlama vektörü, bir çoklu klonlama bölgesine, seçilebilir bir marker genine ve bir raportör genine sahip olmalıdır. Bir klonlama bölgesinin amacı, klonlamanın meydana gelmesi için bir yer sağlamaktır. Seçilebilir bir işaretleyici gen, klonlamadan sonra başarılı rekombinantların tanımlanmasına yardımcı olur ve bir raportör gen, klonlamadan sonra rekombinantlar arasında doğru rekombinantın taranmasına ve tanımlanmasına izin verir. Klonlama vektörü, yabancı DNA'nın kodladığı bir proteinin eksprese edilmesine yardımcı olmak zorunda değildir. Bu nedenle, klonlama vektörünün tek amacı, konakçıya yabancı DNA taşımaktır.
Ekspresyon yapısı olarak da adlandırılan ekspresyon vektörü, konakçı hücre içindeki proteinlerin ekspresyonu için kullanılan bir vektör türüdür. Herhangi bir vektör gibi, bu aynı zamanda ana bölümleri bir çoklu klonlama bölgesi, bir işaretleyici gen ve bir raportör gen içermelidir. Vektör, konakçıya yeni bir gen sokar ve konakçının protein sentez mekanizmasını kullanarak, genin konakçıya eksprese edilmesini sağlar. Ayrıca, ilk odak noktası kararlı m-RNA yapmak ve böylece proteinler yapmaktır. İyi bir örnek ticari insülin üretimidir. İnsülin geni bir bakteriyel plazmid içine sokulur ve E. coli bakteri gövdesine geri sokulur, böylece plazmidler çoğalır ve E. coli'nin büyümesine izin verir, toplanabilen ve kullanılabilen insülin salgılanır.
Şekil 02: İfade Vektörü
Ayrıca, bir ekspresyon vektörünün kuvvetli bir promotör bölgesi, doğru bir translasyon başlatma sekansı ve doğru bir terminatör kodonu ve bir sekansı olmalıdır. Ekspresyon vektörleri, ilaç endüstrisi için insülin, büyüme hormonu, antibiyotikler, aşılar, antikorlar gibi peptitlerin ve proteinlerin üretiminde çok sayıda uygulamaya sahiptir. Ayrıca ekspresyon vektörleri, gıda ve hazır giyim endüstrisinde enzim üretimine yardımcı olur. Sadece bu değil, ekspresyon vektörleri altın pirinç, böcek dirençli bitkiler, herbisite dayanıklı bitkiler, vb.Gibi transgenik bitkilerin üretiminde esastır..
Bir klonlama vektörü, yabancı bir DNA fragmanını konakçı hücreye taşıyan küçük bir DNA molekülüdür; ekspresyon vektörü, genlerin sokulmasını, ekspresyonunu ve proteinlerin üretimini kolaylaştıran bir vektör türüdür. Bu, klonlama vektörü ve ifade vektörü arasındaki temel farktır. Ayrıca, klonlama vektörü ve ekspresyon vektörü arasındaki bir başka önemli fark, bir klonlama vektörünün bir konakçıya yabancı bir DNA fragmanını sokması, ekspresyon vektörlerinin ilgili proteini üreterek sokulan geni eksprese etmesidir..
Ayrıca, klonlama vektörü bir replikasyon kaynağından, kısıtlama alanlarından ve seçilebilir bir işaretleyiciden oluşur. İfade vektörü, arttırıcılar, promotör bölgesi, sonlandırma kodonu, transkripsiyon başlatma sekansı, replikasyon kaynağı, kısıtlama bölgeleri ve seçilebilir bir marker içerir. Bu nedenle, bu aynı zamanda klonlama vektörü ve ekspresyon vektörü arasındaki bir farktır. Ayrıca plazmidler, bakteriyofajlar, bakteriyel yapay kromozomlar, kozmidler, memeli yapay kromozomları, maya yapay kromozomu, vb. Klonlama vektörlerinin örnekleridir. Bu arada, ekspresyon vektörleri çoğunlukla plazmidlerdir.
Moleküler biyolojideki işlevlerine dayanarak, klonlama vektörü ve ekspresyon vektörü olarak iki tip vektör vardır. Bir klonlama vektörü, konukçu hücreye yabancı DNA veren küçük bir DNA molekülüdür. Plazmidler, bakteriyofajlar, bakteriyel yapay kromozomlar, kozmidler ve memeli yapay kromozomları gibi farklı klonlama vektörleri vardır. Aksine, bir ekspresyon vektörü, ilgilenilen geni konukçu hücreye sokan ve gen sentezlemesinin protein ürününü elde etmesini kolaylaştıran bir plazmiddir. Ekspresyon vektörleri plazmidlerdir. Dolayısıyla, bu klonlama vektörü ve ekspresyon vektörü arasındaki farkın özeti.
1. “İfade Vektörü.” Vikipedi, Wikimedia Foundation, 30 Nisan 2019, Burada mevcut.
2. Lodish, Harvey. “Plazmid Vektörlerle DNA Klonlama.” Moleküler Hücre Biyolojisi. 4. Baskı., ABD Ulusal Tıp Kütüphanesi, 1 Ocak 1970,.
1. “BACs klonlama vektörleri Chem114A” Zoragon7 tarafından - Commons Wikimedia üzerinden kendi çalışması (CC BY-SA 4.0)
2. “Amp çoğaltma plakası” Tinastella tarafından - (CC BY-SA 3.0) Commons Wikimedia üzerinden