Elektroforez ve Elektroozmoz
Bazı moleküllerin ayrılması söz konusu olduğunda, filtreleme, damıtma, kolon kromatografisi gibi fiziksel ayırma yöntemleri kolay yöntemler değildir. Elektroforez ve elektro-osmoz yüklü parçacıkları ayırmak için kullanılabilecek diğer iki ayırma tekniğidir.
Elektroforez Nedir?
Elektroforez, moleküllerin boyutlarına göre ayrılması tekniğidir. Bu ayrılma için esas molekülün yükü ve bir elektrik alanında hareket edebilmeleridir. Bu molekülleri, özellikle DNA ve proteinleri ayırmak için moleküler biyolojide en yaygın ve ana tekniktir. Bu çoğunlukla kullanımdadır, çünkü nispeten kolay ve ucuzdur. Elektroforez için cihaz biraz karmaşık olabilir ve hazırlanması biraz zaman alabilir. Ancak laboratuvarda bulunanlardan kolayca bir elektroforez cihazı yapabiliriz. Elektroforez teknikleri amaçlarımıza göre değişebilir. DNA veya proteinin ayrılması için tek boyutlu bir elektroforez kullanabiliriz. Daha kararlı örnekler gerektiğinde (parmak izi durumunda olduğu gibi) iki boyutlu elektroforez kullanılır. Molekülleri ayırmak için destek ortamı olarak bir jel kullanılır. Bu jel düz tabakalar halinde veya tüpler halinde hazırlanabilir. Bu prosedürün temeli, bir elektrik alanı sağlandığında molekülleri bir jel boyunca hareket hızlarına bağlı olarak ayırmaktır. DNA gibi negatif yüklü moleküller, bu elektrik alanındaki pozitif kutba doğru ilerlerken, pozitif yüklü moleküller negatif kutba doğru hareket etme eğilimindedir. Elektroforezde agaroz ve poliakrilamid olarak iki tip jel kullanılır. Bu ikisinin farklı çözme güçleri var. Jel, farklı boyutlardaki molekülleri filtrelemek için bir elek görevi görür. Jelde ayarlanan elektrostatik yükler,.
Ayrılma iyonların hareketliliğine bağlıdır.
F = fv = bölgesi
V = ZeE / f
F = bir parçacığa etkiyen kuvvet
f = sürtünme katsayısı
V = ortalama göç hızı
Z = göç eden parçacığın yükü
e = temel ücret
E = elektrik alanının gücü
Elektroforez için gerekli koşullar nispeten basittir. Jeli yaparken ve numuneyi çalıştırırken bir tampon kullanılır. İşaretleyiciler ve boyalar görselleştirme amacıyla kullanılır.
Elektro-osmoz nedir?
Bu, uygulanan bir elektrik alanı kullanan bir sıvının bir malzemeden geçmesi işlemidir. Hareket, gözenekli bir malzemeden, kılcal, membran vb. Boyunca olabilir. Bu, bir ayırma tekniği (özellikle kılcal elektro-osmoz) olarak kullanılabilir. Sıvının hızı uygulanan elektrik alanıyla doğrusal olarak orantılıdır. Ayrıca kanalı oluşturmak için kullanılan malzemeye ve kullanılan çözeltiye de bağlıdır. Arayüzde, çözelti ve malzeme zıt yükler elde etmiştir ve bu, elektrikli bir çift tabaka olarak bilinir. Çözeltiye bir elektrik alanı uygulandığında, elektriksel çift tabaka ortaya çıkan Coulomb kuvveti ile hareket eder. Bu elektro-ozmotik akış olarak bilinir.
Elektroforez ve Elektro-osmoz arasındaki fark nedir? • Elektroforezde katı partiküller (nükleik asitler veya proteinler gibi makromoleküller) bir elektrik alanı kullanılarak hareket ettirilir. Ancak elektro-ozmozda bir sıvı hareket ediyor. • Elektroforezde, destek katı malzemesi bir jeldir. Ancak elektro-osmoz bir jel, membran, kılcal, vb.. |