İmmünositokimya (ICC) ve İmmünohistokimya (IHC), moleküler tanıda yaygın olarak kullanılan ve hem bulaşıcı olmayan hastalıkların hem de hücrelerde bulunan moleküler markörlere dayalı bulaşıcı hastalıkların oluşumunu tanımlayan ve teyit eden iki tekniktir. İmmünositokimya ve immünohistokimyanın temel farkı, bu tekniklerde analiz prosedürü olarak kullanılan moleküldür. ICC'de, floresan gibi markörlerle konjüge edilmiş primer ve sekonder antikorlar kullanılırken, teşhis belirlemeleri için IHC, monoklonal ve poliklonal antikorlar kullanılır..
1. Genel Bakış ve Temel Fark
2. İmmünositokimya nedir
3. İmmünohistokimya nedir
4. İmmünositokimya ve İmmünohistokimya Arasındaki Benzerlikler
5. Yan Yana Karşılaştırma - Tablo Şeklinde İmmünositokimya ve İmmünohistokimya
6. Özet
ICC, floresan markerler veya enzimler gibi markörlere bağlı primer ve sekonder antikorlar kullanır ve enfeksiyöz hücresel partiküller veya kanserli tümör hücreleri olabilecek hedef hücreler üzerinde bulunan antijenleri saptamak için güçlü bir tespit yöntemidir. İmmünositokimya için üç tip kontrol gereklidir.
Şekil 01: İmmünositokimya, hücrelerdeki bireysel proteinleri etiketler (burada, sempatik otonom nöronların aksonlarındaki tirosin hidroksilaz yeşil renkte gösterilir).
Birincil antikor kontrolü her yeni antikor için spesifiktir ve her deney için tekrarlanamaz. İkincil antikor kontrolü, deneyde kullanılan birincil antikora dayalı olarak tasarlanır ve her deneyle birlikte verilir. Prosedürün bir durumu değiştirilirse, numune değiştirilirse veya beklenmedik etiketleme bulunursa etiketleme kontrolü dahil edilir.
ICC'nin iki ana uygulaması Radyo İmmüno - Deney (RIA) ve Enzim Bağlantılı İmmünosorbent Deney (ELISA) 'dır. Kullanılan en yaygın antikor immünoglobulin G'dir.
İmmünohistokimyada, kaynak numune, yabancı hücrelerde antijen varlığını belirlemek için monoklonal ve poliklonal antikorlar içerir. Bu teknik, antijen-antikor bağlanmasının spesifik reaksiyonuna dayanmaktadır. Tespitte kullanılan antikorlar farklı markörler ile etiketlenebilir; flüoresans belirteçleri, radyoaktif işaretli işaretleyiciler veya kimyasal işaretleyiciler olabilir. Kolaylaştırarak laboratuvar ortamında antijen ve hedeflenen antikor arasında bağlanma, bir hücrenin belirli bir proteininin varlığı veya yokluğu belirlenebilir.
Şekil 02: CD10 ile normal böbreğin immünohistokimyasal boyanması
Şu anda, bilim adamları, malign tümör hücreleri veya HIV gibi enfeksiyöz ajanlarda bulunan antijenler olarak gelişebilen hücrelerde bulunan spesifik antijenler için hedef antikorların geliştirilmesinde yer almaktadır..
İmmünositokimya (ICC) ve İmmünohistokimya (IHC) | |
ICC, floresan markerler veya enzimler gibi primer ve sekonder antikorlar bağlı markörler kullanır ve hedef hücreler üzerinde mevcut antijenleri saptamak için güçlü bir tespit yöntemidir. | IHC, hücre yüzeylerine yerleştirilen özel protein markerleri olan antijenlerin varlığını belirlemek için monoklonal ve poliklonal antikorları kullanan bir yöntemdir. |
Örnek Kaynak | |
Histolojik olarak ince kesitlere işlenmiş dokulardan türetilen örnekler ICC'de kullanılır. | IHC, tek tabakalı olarak büyütülen hücreler veya bir slayt üzerine bırakılan süspansiyondaki hücrelerden oluşan örnekleri kullanır. |
Örnek İşleme | |
ICC'de hücreler, hücre içi hedeflere antikor penetrasyonunu kolaylaştırmak için geçirgen olmalıdır. | IHC'de, hücreler boyama öncesi formalinle sabitlenmiş, parafine gömülmüştür. |
Moleküler teşhis, hem bulaşıcı olmayan hastalıkların hem de bulaşıcı hastalıkların oluşumunu hücrelerde bulunan moleküler belirteçlere dayanarak tanımlamak ve doğrulamak için kullanılır. Moleküler markörler, DNA veya RNA'nın proteinleri veya sekansları olabilir; ICC ve IHC gibi teknolojilerin geliştirilmesi, bilim insanlarının hastalığı ve nedenini erken bir aşamada tanımlamalarını sağlamıştır. Hem ICC hem de IHC, numune kaynağı olmasına rağmen antikor ve antijen arasındaki spesifik reaksiyonlara bağlıdır. İmmünositokimya ve immünohistokimya arasındaki temel fark, iki prosedürün örnek işlenmesidir.
Bu makalenin PDF sürümünü indirebilir ve alıntı notuna göre çevrimdışı amaçlar için kullanabilirsiniz. PDF versiyonunu buradan indirebilirsiniz. İmmünositokimya ve İmmünohistokimya Arasındaki Fark.
1. Burry, Richard W. “İmmünositokimya Kontrolleri: Bir Güncelleme.” Histokimya ve Sitokimya Dergisi, SAGE Yayınları, Ocak 2011, Burada bulunabilir. Erişim tarihi: 24 Ağu 2017.
2. Duraiyan, Jeyapradha ve ark. “İmmünohistokimya uygulamaları.” Eczacılık ve Biyolojik Bilimler Dergisi, Medknow Publications & Media Pvt Ltd, Ağustos 2012, Buradan ulaşabilirsiniz. Erişim tarihi: 24 Ağu 2017.
1. “İmmünohistokimya” Swharden tarafından - Commons Wikimedia üzerinden kendi çalışması (CC BY-SA 3.0)
2. “Böbrek cd10 ihc” Nephron tarafından - Commons Wikimedia üzerinden kendi çalışması (CC BY-SA 3.0)