İnce Kağıt Katmanı ve Kolon Kromatografisi Arasındaki Fark

Anahtar Fark - Kağıt vs İnce Katman vs sütun Kromatografi
 

Kağıt kromatografisi, ince tabaka kromatografisi ve kolon kromatografisi üç tip kromatografik tekniktir. temel fark kağıt kromatografisi, ince tabaka kromatografisi ve kolon kromatografisi arasında kromatografi tekniğinde kullanılan durağan faz tipine dayanır.. Kağıt kromatografisi durağan fazı olarak bir selüloz kağıdı kullanır, İnce Tabaka kromatografisi durağan fazı olarak alümina veya silika jeli kullanır, Sütun kromatografisi ise durağan fazı olarak uygun bir matris malzemesi ile paketlenmiş bir sütun kullanır..

Protein ve karbonhidrat gibi biyomoleküllerin ayrılması ve tanımlanması sürecinde, kromatografi kullanılan önemli bir biyofiziksel tekniktir. Kromatografi bileşikleri çözünürlük, boyut ve yüklerine göre ayırır. Ayırma mekanizmasına bağlı olarak, kromatografi iyon değişimi, emilim, bölme ve boyut dışlama gibi mekanizmalar kullanır ve üç kromatografik teknik vardır; kağıt, ince tabaka ve kolon kromatografisi. Kağıt kromatografisi, bileşiğin katı-sıvı adsorpsiyonu ve çözünürlüğüne dayanır ve sabit faz olarak bir selüloz kağıdı kullanır. İnce tabaka kromatografisi moleküllerin katı-sıvı adsorpsiyonuna dayanır. Tipik olarak alümina veya silika jelden yapılmış sabit bir faza ve çözücü olan mobil faza sahiptir. Sütun kromatografisi, molekülleri esas olarak boyutlarına, afinitesine veya yüküne göre ayırmak için kullanılan bir matris ile paketlenmiş bir sütun kullanır.

İÇİNDEKİLER

1. Kromatografiye Genel Bakış ve Temel Fark
2. Kağıt Kromatografisi Nedir
3. İnce Tabaka Kromatografisi Nedir
4. Kolon Kromatografisi Nedir
5. Kağıt, İnce Tabaka ve Kolon Kromatografisi Arasındaki Benzerlikler
6. Yan Yana Karşılaştırma - Tabular Formunda Kağıt vs İnce Tabaka vs Sütun Kromatografisi
7. Özet

Kağıt Kromatografisi Nedir?

Kağıt kromatografisi, kullanılan en basit kromatografi türüdür ve kapsamlı araştırmalar için kullanılmaz. Esas olarak öğrenci laboratuvarlarında, karışımlarda bulunan amino asitler ve karbonhidratlar gibi biyomolekülleri tanımlamak için kullanılır. Kağıt kromatografisinde, selüloz kağıt veya Whatman filtre kağıdı kullanılarak yapılan sabit bir faz ve genellikle n-butanol gibi organik çözücüler kullanılarak hazırlanan bir mobil faz kullanılır. Sabit faz, su ile doyurulur ve sabit faz sıvısı yapılır. Böylece, bileşikler tespit edildiğinde ve mobil fazın varlığında çalışmasına izin verildiğinde, bileşiklerin çözünürlüğüne bağlı olarak, bunlar ayrılır. Böylece, kromatogramın geliştirilmesi üzerine, her bir bileşiğin uzunluğunu belirlemek için boyama yapılabilir. Tutma faktörü böylece hesaplanabilir.

Şekil 01: Kağıt Kromatografisi

Kağıt kromatografisi ayrıca çalışan çözücünün yönüne bağlı olarak artan kağıt kromatografisi ve azalan kağıt kromatografisi olarak sınıflandırılabilir..

İnce Tabaka Kromatografisi Nedir?

İnce tabaka kromatografisi veya TLC "Sikloalkil", bir karışımda bulunan farklı amino asitleri tanımlamak veya proteinleri tanımlamak için yaygın olarak kullanılan bir tekniktir. Ayırma tekniği katı-sıvı adsorpsiyonuna dayanır. İnce tabaka kromatografisi sırasında, durağan faz olarak alümina veya silika jelden yapılmış bir plaka kullanılır. Çözücü karışımı, ihtiyaca göre değişir ve çözücüyü hazırlamak için n-butanol, asetik asit ve su gibi farklı organik bileşik kombinasyonlarını kullanabilir. Ayrılacak olan bileşikler plaka üzerinde lekelenmekte ve çözücü karışımına daldırılmaktadır. Çözücü, plaka tarafından verilen kılcal etkiye dayanarak hareket ettiğinde, plaka üzerinde lekelenen bileşikler, çözücü içindeki çözünürlüklerine bağlı olarak da hareket ederler..

Resim 02: İnce Tabaka Kromatografisi

Kromatogramdan sonra lekelerin saptanması, farklı boyama prosedürleri ile gerçekleştirilir. Bazıları oldukça toksik bir boyama yöntemi olan ninhidrin boyamasını kullanır. Modern ince tabaka kromatogramları çalışmadan sonra kromatogramı görüntülemek için floresan teknikleri kullanır. Kat ettiği mesafelere bağlı olarak, her bir bileşiğin alıkonma süresi hesaplanabilir. Bu, kullanılan karışıma göre ayrılan bileşik tipini tanımlamak için kullanılabilir. TLC esas olarak bir protein karışımındaki amino asitleri tanımlamak ve ayrıca bir karışımda bulunan farklı tipte monosakkaritleri ayırmak için kullanılır.

Kolon Kromatografisi Nedir?

Kolon kromatografisi, kolon bazlı ayırma yöntemini kullanan birçok kromatografi tekniğini tarif etmek için kullanılan geniş bir terimdir. Kolon kromatografisinde, bileşikleri ayırmak için bir ambalaj malzemesi ile fiziksel bir sütun kullanılır. Ayrılma, bileşikler tarafından sergilenen farklı fiziksel özelliklere dayanabilir. Bu özellikler, yük, boyut, 3D konformasyon ve bağlama kapasitesi, vb. Olabilir. Böylece, matris malzemesi ile paketlenmiş sütun, sabit faz olarak hareket eder ve kolona uygulanan yıkama tamponu, mobil faz olarak işlev görür..

Moleküller büyüklüğe göre ayrılırsa, ambalaj malzemesi bileşiklerin geçmesi için gözenekler bırakacak şekilde paketlenir. Böylece, gözeneklerden geçemeyen daha büyük moleküller önce elüte edilirken, daha küçük moleküllerin ayrışması çok daha uzun sürer..

Resim 03: Kolon Kromatografisi

Moleküller yüklerine göre ayrılırsa, sabit faz, yüklerine göre bileşiklerin çekileceği bir anyon veya katyon değiştirici içerecektir. Böylece yıkama aşaması sırasında bağlı olmayan bileşikler elüte edilecektir. Elüsyon tamponu ilave edildikten sonra, bağlı yüklü bileşikler elüte edilecektir. Bu eluentlerin saptanması çoğunlukla spektrofotometrik tekniklere dayanmaktadır..

Kağıt İnce Tabaka ile Kolon Kromatografisi Arasındaki Benzerlikler Nelerdir??

• Amino asitler, proteinler ve karbonhidratlar gibi biyomoleküllerin ayrılması için tüm Kağıt İnce Katman ve Kolon Kromatografisi üç teknik kullanılır.
• Kağıt İnce Tabaka ve Kolon Kromatografisi tekniklerinin hareketli ve sabit fazları vardır.
• Kağıt İnce Tabaka ve Kolon Kromatografisi tekniklerinde ayırma için biyofiziksel mekanizmalar kullanılır.

Kağıt İnce Tabaka ile Kolon Kromatografisi Arasındaki Fark Nedir??

Kağıt vs İnce Katman vs Sütun Kromatografisi
Kağıt kromatografisi	Kağıt kromatografisi, bileşiğin sıvı-sıvı adsorpsiyonu ve çözünürlüğüne dayalı olarak bileşiklerin ayrılması için kullanılan kromatografik bir tekniktir. Sabit aşaması olarak bir selüloz kağıdı kullanır.
İnce Tabaka Kromatografisi	İnce tabaka kromatografisi, moleküllerin katı-sıvı adsorpsiyonuna dayanan başka bir kromatografik tekniktir. Alümina veya silika jelden oluşan sabit bir faza ve mobil faz olarak bir solvente, yani solvente sahiptir..
Kolon kromatografısi	Sütun kromatografisi, molekülleri esas olarak boyutlarına, afinitesine veya yüküne göre ayırmak için kullanılan bir matris ile paketlenmiş bir sütun kullanır.
Durağan faz
Kağıt kromatografisi	Whatman'ın nitroselülozundan yapılmış kağıt, kağıt kromatografisinde sabit faz olarak kullanılır.
İnce Tabaka Kromatografisi	Alümina veya Silika jel, ince tabaka kromatografisinin durağan fazı olarak kullanılır.
Kolon kromatografısi	Kolon kromatografisinde sabit faz olarak uygun paketleme malzemesi ile paketlenmiş bir kolon kullanılır..
Mobil aşama
Kağıt kromatografisi	Çalışan solvent, kağıt kromatografisinin mobil fazıdır.
İnce Tabaka Kromatografisi	Çalışan çözücü, ince tabaka kromatografisinin mobil fazıdır.
Kolon kromatografısi	Yıkama tamponu kolon kromatografisinin mobil fazıdır.
Ayırmada Kullanılan Mekanizmalar
Kağıt kromatografisi	Kağıt kromatografisi katı-sıvı emilimine dayanır.
İnce Tabaka Kromatografisi	İnce tabaka kromatografisi katı-sıvı emilimine dayanır..
Kolon kromatografısi	Sütun kromatografisi boyut hariç tutma, yük ve şekle dayanır.
Elüsyon Tamponu
Kağıt kromatografisi	Kağıt kromatografisi için gerekli değildir.
İnce Tabaka Kromatografisi	İnce tabaka kromatografisi için gerekli değildir.
Kolon kromatografısi	Kolon kromatografisinde gereklidir.
Tespit etme
Kağıt kromatografisi	Boyama ve Tutma faktörünü belirleyerek.
İnce Tabaka Kromatografisi	Boyama ve Tutma faktörünü belirleyerek.
Kolon kromatografısi	Spektrofotometrik tayin.

özet - Kağıt İnce Tabaka vs sütun Kromatografi

Kağıt kromatografisi, TLC ve kolon kromatografisi, proteinler, amino asitler ve karbonhidratlar (çoğunlukla monosakkaritler) gibi biyomolekülleri ayırmak için kullanılan ayırma teknikleridir. Kağıt kromatografisi, sabit faz olarak bir selüloz kağıt kullanır ve ayırma mekanizması katı-sıvı adsorpsiyonuna dayanır. TLC ayrıca katı-sıvı adsorpsiyon mekanizmaları kullanır. Moleküller, mobil fazdaki çözünürlüklerine bağlı olarak sabit fazda ayrılır. Kolon kromatografisi, ayrılmak için bileşiğin boyutu, şekli, yükü ve molekül ağırlığı gibi fiziksel özellikleri kullanır. Matris malzemesi ile paketlenmiş sütun sabit faz görevi görürken, yıkama tamponu çözücü faz görevi görür. Bu, kağıt ince bir tabaka ile kolon kromatografisi arasındaki farktır.

Referans:

1. tıkırtı Jim. “İNCE KATMAN KROMATOGRAFİSİ.” İnce Tabaka Kromatografisi, 2007. Buradan erişilebilir 
2.Çoskun, Özlem. “Ayırma Teknikleri: Kromatografi.” İstanbul Kuzey Klinikleri, Kare Yayıncılık, 2016. Buradan ulaşabilirsiniz 

Görünüm inceliği:

1. Commons Wikimedia üzerinden 'Kromatografi tankı' (CC BY-SA 3.0)  
2.'Tlc dizisi 'Quantockgoblin tarafından, (Public Domain) Commons Wikimedia üzerinden
3. Commons Wikimedia aracılığıyla 'Sütun kromatografisi' (Kamusal Alan)